2011 Fiscal Year Annual Research Report
消化管筋線維芽細胞プロテアーゼ活性化受容体の炎症性刺激による発現調節機構
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22580334
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
佐藤 晃一 山口大学, 農学部, 教授 (90205914)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大浜 剛 山口大学, 農学部, 准教授 (50579018)
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| Keywords | PAR / 炎症 / 筋線維芽細胞 / 受容体脱感作 |
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| Research Abstract |
プロテアーゼ活性化受容体(PAR)は、トリプシンなどのプロテアーゼによって受容体自身が持つリガンド部位が露出し、受容体自身に結合して活性化する。一方、粘膜上皮細胞の分化増殖の足場になる消化管筋線維芽細胞の,線維化過程におけるPARの役割は明らかとされていない。そこで,本研究では,消化管筋線維芽細胞におけるPARの役割と発現調節機構を,常在型マクロファージとの相互反応という観点から明らかにすることを目的とした。
1)炎症性刺激によるPAR発現の時間的・空間的変化
炎症に伴い増加するprostaglandin E2は細胞内cAMP濃度が増加することで,PAR2タンパク質発現量を変化させることなく,細胞膜のPAR2発現量が減少し細胞内発現量が増加した。そこで,より直接的にPAR2の空間的変化を確かめるため,Flag-PAR2を強制発現させた細胞の作成に着手し成功した。H24年度にその細胞を利用して空間的変化について更に検討する。
2)消化管筋線維芽細胞の機能に関する研究
消化管筋線維芽細胞に対するPAR2発現とその活性化の影響はこれまで検討されていなかった。我々は,単離初代培養筋線維芽細胞標本を用いてこの点について検討し,PAR1,2,3,4が発現していること,また,PAR2刺激によりこの遊走能が活性化されることを見出した。また,筋線維芽細胞の病態生理機能解析のために,スフィンゴシンによる遊走能変化についても検討し,スフィンゴシン受容体2を介して遊走能が抑制されていることを明らかとした。
3)マクロファージのLPS受容体のトリプシンによる変化
常在型マクロファージの機能に対する,PAR2活性化薬トリプシンの役割を検討した。・トリプシンはPAR2受容体を介することなく,正PS受容体活性化経路を抑制し,それはセリンープロテアーゼ機能に由来するCD14タンパク質の分解に寄ることが明らかとなった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の研究目的である,消化管筋線維芽細胞のプロテアーゼ活性化受容体の炎症性刺激による発現調節機構を解明することに向け研究を行った結果,プロスタグランジンE2が細胞内cAMPを増加させることで,空間的制御を受けていることを明らかとした。
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| Strategy for Future Research Activity |
筋線維芽細胞の研究をより簡便にするために,不死化細胞の樹立を行う。また,上皮細胞との相互作用についても検討し,炎症性刺激が上皮細胞に由来すること,また筋線維芽細胞からの刺激により,上皮細胞が影響を受けていることを明らかにする。
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