2012 Fiscal Year Annual Research Report
ヒトＫチャネルの受容体刺激によるエンドサイトーシスの可能性と情報伝達機構の解明
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22590235
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| Research Institution | Yamagata University |
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Principal Investigator |
石井 邦明 山形大学, 医学部, 教授 (10184459)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山崎 良彦 山形大学, 医学部, 准教授 (10361247)
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| Project Period (FY) |
2010-04-01 – 2013-03-31
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| Keywords | エンドサイトーシス / 受容体 / 電位依存性Kチャネル |
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| Research Abstract |
ヒト心室筋活動電位の再分極において重要なIKsチャネル（Q1/E1チャネル）がアンジオテンシン受容体1型（AT1受容体）およびα1A受容体の活性化によってエンドサイトーシスされること、そしてAT1受容体刺激によるエンドサイトーシスにはQ1蛋白のC末端に存在するPKCリン酸化部位が必要であるのに対し、α1A受容体刺激の場合は、その部位の関与はないことを昨年度までに明らかにした。本年度は、以下の結果を得た。
1. Nedd4-2によるQ1蛋白のエンドサイトーシスが報告されていたため、ユビキチン化の関与について検討した。Q1のC末端に存在するPYモチーフ（Nedd4による認識に関与）の変異体を作製し発現させたところ、AT1受容体刺激によるエンドサイトーシスは影響を受けなかったが、α1A受容体刺激によるエンドサイトーシスは認められなくなった。ユビキチン化の関与について、両受容体間で異なっている可能性が示唆された。抗ユビキチン抗体を用いた検討では、未だ明確な結論は得られていない。
2. Q1のC末端に存在するYXXΦモチーフ（クラスリン依存性エンドサイトーシスに関わるアダプター蛋白AP-2が認識する）に変異を入れて検討したところ、両受容体刺激の場合ともQ1蛋白のエンドサイトーシスが認められなくなった。
3. 初期エンドソーム・リソソーム・リサイクリングエンドソームの局在マーカーとQ1およびα1A受容体を同時に発現させ、エンドサイトーシス後の経路について検討した。刺激後60分間で、各小器官との共局在の可能性を示唆するデータが得られたが、詳細は今後の検討が必要である。
4. α1A受容体とα1B受容体では、受容体そのもののエンドサイトーシスに大きな違いが認められるため、α1B受容体についての検討を行った。これまでに得られたデータに関しては、α1B受容体の作用はα1A受容体とほぼ同様である。
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| Current Status of Research Progress |
Reason
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(9 results)
