2011 Fiscal Year Annual Research Report
胸膜中皮腫発生・進展に関わるエピジェネティクス変化の病理病態解析
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22590333
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| Research Institution | Kobe University |
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Principal Investigator |
出射 由香 神戸大学, 医学研究科, 医学研究員 (90464271)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
北澤 荘平 愛媛大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (90186239)
北澤 理子 神戸大学, 医学研究科, 特命准教授 (00273780)
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| Keywords | 中皮腫 / エピジェネティクス / E-カドヘリン / 遺伝子プロモータ / DNAメチル化 |
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| Research Abstract |
エピジェネティクス制御機構は、再生医療、分子標的癌治療へと展開しているポストゲノム時代の重要な研究課題である。本研究課題では、アスベスト曝露後の悪性中皮腫に焦点を当て、酸化的ストレスとDNAメチル化集積との関連について、労災病院との共同研究により、悪性中皮腫病理組織検体によるDNAメチル化の評価をめざすものである。
多くの悪性中皮腫症例で見られる組織形態として、腫瘍組織の上皮様構造(癌腫様構造)と肉腫様構造の2相性をもつことに着目して,病理標本の特定部位から切り出した微量検体でのDNAメチル化検出の予検討を行った。腫瘍細胞の増殖との関連については、癌抑制遺伝子のひとつであるP16の発現、遺伝子プロモータ領域のメチル化について、検討を行った。腫瘍の形態に関与する遺伝子の解析としては、癌腫様部分では腫瘍細胞相互の細胞結合が見られE-カドヘリンが発現しているが、肉腫形態の部分では、腫瘍細胞は散在性で細胞結合がなく、E-カドヘリンの発現がない。両者の移行像が存在することから、遺伝子欠失による発現低下よりも、プロモータ領域のメチル化による発現抑制が想定される。腫瘍の形態学的特徴に基づいて特定部位を切り出した微量検体を用いて、E-カドヘリン遺伝子プロモータ領域のメチル化を検出するMSP(メチル化特異的PCR)法を施行するとともに、メチル化部位を特定するために、bisulfite処理後のシークエンスによる解析をすすめている。
さらに、アスベスト曝露歴を有する心膜原発中皮腫症例において、心膜の主病巣と、肺胸膜腫瘍部、非腫瘍部肺実質をサンプリングして解析を進めている。
これまでのメチル化による発現制御に関する知見は、Cancersに掲載され、また病理組織標本からの解析方法については、検査と技術誌に報告した。
病理検体の組織像に基づいた解析結果は、今後、内外の学会にて報告する予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
病理組織検体からの、形態学的特徴に着目して特定部位の切り出し、微小検体のアガロースビーズ法、bisulfite処理・PCR・メチル化の検索等の、中皮腫組織標本における条件設定は、順調に進行している。
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| Strategy for Future Research Activity |
E-カドヘリン発現にたいするエピジェネティクス制御に加えて、上皮間質移行(EMT)を制御する因子についても、組織形態に着目して、解析を進める。
さらに、培養細胞を用いた実験系で、エピジェネティクス制御とEMTについて検討する。
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