2010 Fiscal Year Annual Research Report
HSP27のアセチル化修飾が腫瘍形成能に与える影響の検討
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22590337
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| Research Institution | Iwate Medical University |
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Principal Investigator |
及川 浩樹 岩手医科大学, 医学部, 講師 (50285582)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
前沢 千早 岩手医科大学, 医学部, 教授 (10326647)
小谷 康慈 岩手医科大学, 医学部, 助教 (50433488)
稲葉 亨 岩手医科大学, 医学部, 助教 (60405800)
増田 友之 岩手医科大学, 医学部, 教授 (10199698)
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| Keywords | アセチル化 / HSP27 / 乳癌 / アポトーシス / 細胞増殖 |
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| Research Abstract |
Heat shock protein 27(HSP27)は乳癌で発現が亢進しており、腫瘍形成能および化学療法への耐性の要因となっている。一方、最近、さまざまな分子がリジン残基のアセチル化修飾により、機能が制御されているという報告が認められる。しかし、HSP27のアセチル化修飾についての報告は認められず、この修飾がどのような細胞機能に影響を与えるかは不明である。そこで、本研究では、HSP27のアセチル化修飾が腫瘍形成能および化学療法への耐性にどのような影響を及ぼすかを明らかにし、そのアセチル化修飾の制御に関して、臨床応用への研究基盤を確立することを目的とする。今年度は以下の成果を得た。1. immunoprecipitationによりHSP27とHDAC6が細胞内で結合していることが確認された。2. TsAおよびHDAC6 siRNAで処理した乳癌細胞株MB231を対象に、HSP27でimmunoprecipitationし、アセチル化抗体でimmunoblotすると、HSP27のアセチル化が亢進しているようにみえたが、アセチル化抗体でimmunoprecipitationし、HSP27でimmunoblotすると、HSP27のアセチル化の亢進は確認できなかった。2. そこで、HSP27の7カ所のリジン残基を順次アルギニンに変換し、アセチル化が生じないと想定されるvectorを作製し、immunoblotにてHSP27のアセチル化状態を検討したが、アセチル化状態の変化を検出する事はできなかった。3. 更にTSA処理を行いLC-MS/MSにてHSP27のアセチル化状態を検討したが、有意な結果は得られなかった。以上から、HSP27のアセチル化は明らかでないと考えられるため、次年度はHSP27とβ-cateninの結合と、それが腫瘍形成能に与える影響を検討する予定である。
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