2012 Fiscal Year Annual Research Report
骨髄造血幹細胞増殖制御システムを用いた骨髄キメリズム導入とヒト疾患モデル治療
Project/Area Number |
22590355
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Research Institution | Kitasato University |
Principal Investigator |
竹内 康雄 北里大学, 医学部, 講師 (60286359)
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Project Period (FY) |
2010-04-01 – 2013-03-31
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Keywords | 造血幹細胞移植 / 遺伝子治療 / Lnk 蛋白 / 幹細胞増殖能制御 / 移植前処置軽減 |
Research Abstract |
(1)Lnkドミナントネガティブ変異体 (Lnk-DN) 遺伝子導入用ウイルス作製:ウイルスベクターにLnk-DN +発現マーカー(Plum) 遺伝子を組み込み(Lnk-DN+Plum) 遺伝子導入用ウイルス作製した。発現解析のため Jurkat 細胞に導入したがPlum の発現輝度が非常に低かった。ウイルス作製の条件(プラスミド使用量、パッケージング細胞の培養条件など)を検討したが輝度亢進は得られずPlum 色素自体の輝度の低さと考えられた。本来の目標である、HSCへのgp91phox +Lnk-DN 遺伝子の同時導入(KO + Plum) をJurkat 細胞で解析するも二重陽性細胞は正確には同定できなかった。他の発現マーカー候補がなくgp91phox + KOベクターにLnk-DN を組み込むこととし、現在同ベクターの作成中である。 (2)Lnkドミナントネガティブ変異体 (Lnk-DN) 遺伝子導入後のHSC増殖能の検討:きわめて低輝度であるため確実に判断できないが、マウスHSCにPlum単独及びLnk-DN-Plum遺伝子を導入し、陽性と判断される細胞集団をフローサイトメーターで分離しマウスへの移植を試みた。現在、経過観察中である。
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Current Status of Research Progress |
Reason
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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Strategy for Future Research Activity |
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(1 results)