2012 Fiscal Year Annual Research Report
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22590429
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| Research Institution | National Institute of Infectious Diseases |
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Principal Investigator |
石井 孝司 国立感染症研究所, ウイルス第二部, 室長 (40280763)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
李 天成 国立感染症研究所, ウイルス第二部, 主任研究官 (90370957)
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| Project Period (FY) |
2010-04-01 – 2013-03-31
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| Keywords | ウイルス / 病原性 / 治療薬 / スクリーニング / 分子生物学 |
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| Research Abstract |
E型肝炎ウイルス(HEV)に感染したブタ肝臓より組織乳剤を作成し、PLC/PRF/5細胞に感染させ、本細胞で増殖可能なHEV株83-2を取得した。この83-2株からHEVの感染性クローンを作成し、本クローンの構造蛋白領域をレポーター遺伝子と置き換えたHEVレプリコンの作成に成功した。特に、レポーター遺伝子としてルシフェラーゼを持つレプリコンは、ウイルスの細胞内での増殖を感度よくモニターできる系として用いることができる。現在、LOPAC化合物ライブラリをHEVレプリコン導入後のPLC/PRF/5細胞に添加し、ウイルス増殖を抑制する化合物のスクリーニングを行っており、同定された化合物の作用からHEV増殖メカニズムの解析を行う予定である。また、reverse geneticsの手法によりHEVの感染性を規定する領域の解析、感染細胞内でのウイルス複製機構の解析も実施している。 一方、PLC/PRF/5細胞にHEVを感染させ、抗HEV抗体を用いて蛍光抗体染色を行うと、長期間培養後もHEVに感染していない細胞が見られ、この細胞株はヘテロな集団であることが推測された。そのため、single cell cloningを行い、クローニングされた多数の細胞株についてHEVの感染性を調べたところ、増殖性のない細胞株が複数見出された。このスクリーニングにより取得できた、HEVが感染できる細胞とできない細胞の性状を比較解析することにより、宿主側でHEV感染に重要な役割を果たすと考えられる因子の解析を行っている。現在、感受性細胞からcDNAライブラリを構築し、このライブラリを非感受性細胞に導入し、感受性になった細胞に導入された遺伝子を解析することで、HEVの細胞への感受性を規定している因子の同定を進めている。
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| Current Status of Research Progress |
Reason
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(15 results)
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[Journal Article] Hepatitis A outbreak associated with a revolving sushi bar in Chiba, Japan: application of molecular epidemiology.2012
Author(s)
Tominaga A., Kanda T., Akiie T., Komoda H., Ito K., Abe A., Aruga A., Kaneda S., Saito M., Kiyohara T., Wakita T., Ishii K., Yokosuka O. and Sugiura N.
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Journal Title
Hepatology Research
Volume: 42
Pages: 828-834
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[Journal Article] Possible widespread presence of hepatitis A virus subgenotype IIIA in Japan: recent trend of hepatitis A causing acute liver failure.2012
Author(s)
Ishii K., Miyamura T., Kanda T., Tawada A., Sekimoto T., Wu S., Nakamoto S., Arai M., Fujiwara K., Imazeki F., Kiyohara T., Wakita T. and Yokosuka O.
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Journal Title
Hepatology Research
Volume: 42
Pages: 248-253
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[Presentation] X-ray crystallographic studies on binding specificity of norovirus to Lewis antigens.2012
Author(s)
Kubota T., Kumagai A., Ito H., Furukawa S., Someya Y., Ishii K., Wakita T., Takeda N., Shirato H., Narimatsu H.
Organizer
4th Asian Communications of Glycobiology and Glycotechnology.
Place of Presentation
Jeju, Korea
Year and Date
20121028-20121031
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[Presentation] Antigenicity and infectivity of rat hepatitis E virus.2012
Author(s)
Li T.C., Yoshimatsu K., Yasuda S., Arikawa J., Kataoka M., Ami Y., Suzaki Y., Ishii K., Takeda N., Wakita T
Organizer
The 9th Japan-China International Conference of Virology.
Place of Presentation
Sapporo, Japan
Year and Date
20120612-20120613
