形質細胞様樹状細胞特異的遺伝子改変マウスによる樹状細胞の動態制御機構の解明

2012 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 22590444
• Research Institution: Kagawa University
• Principal Investigator: 星野 克明 香川大学, 医学部, 教授 (50324843)
• Project Period (FY): 2010-04-01 – 2013-03-31
• Keywords: 形質細胞様樹状細胞

Research Abstract

形質細胞様樹状細胞（pDC）の動態と機能を明らかにするために、pDC優位に発現するSiglecH遺伝子のプロモーター下流に、蛍光タンパク質Kikume Green-Red (KikGR)遺伝子をノックインしたマウス系統を樹立した。この系統の樹状細胞を解析した結果、脾臓のpDC、およびCD8陽性樹状細胞の一部で蛍光色が見られた。また、骨髄細胞をFlt3 ligandと共に培養して得た樹状細胞も、pDCとCD24陽性樹状細胞（脾臓のCD8陽性樹状細胞に相当）の一部が光った。この光るCD8陽性樹状細胞分画は、pDC特異的な膜タンパク質（SiglecH、CCR9、Ly49Q）の発現が陰性であり、なぜ光るのか解らない。故に、この系統でpDCのみを標識できないと考えた。
pDC特異的な遺伝子欠損系を作るために、SiglecH遺伝子座にcreレコンビナーゼ遺伝子をノックイン系統も樹立した。この系統とROSA-loxP-STOP-loxP-tdRFPノックインマウスを交配し、cre発現の特異性を調べたが、血球細胞が全て光ってしまい、pDCにおける発現特異性は見られない。個体発生、あるいは血球細胞の発生時に、creが発現していると考えられ、この系は実現不能と結論した。
代替案として、個体発生時のcre活性を無視するために、タモキシフェン誘導性cre遺伝子（creERT2）ノックイン系統を樹立した。タモキシフェン投与によるCreの効果を確認するために、この系統とROSA-loxP-STOP-loxP-tdRFPノックインマウスを交配し仔マウスを得た。pDCの蛍光発現について検討を行っている。
SiglecH以外に、CCR9についてもKikGR遺伝子ノックイン系統を樹立した。この系統ではpDCが明るく光るが、他の樹状細胞サブセットの一部も光ってしまうので、pDCのみを標識できないと結論した。

Current Status of Research Progress

Reason

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

24年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] Enhanced Apoptosis by Disruption of the STAT3-IkappaB-zeta Signaling Pathway in Epithelial Cells Induces Sjogren's Syndrome-like Autoimmune Disease (2013)
  • Author(s): Atsushi Okuma
  • Journal Title: Immunity Volume: 38 Pages: 450-460
  • DOI: 10.1016/j.immuni.2012.11.016
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Spi-B is critical for plasmacytoid dendritic cell function and development (2012)
  • Author(s): Sasaki, I., Hoshino, K., Sugiyama, T., Yamazaki, C., Yano, T., Iizuka, A., Hemmi, H., Tanaka, T., Saito, M., Sugiyama, M., Fukuda, Y., Ohta, T., Sato, K., Ainai, A., Suzuki, T., Hasegawa, H., Toyama-Sorimachi, N., Kohara, H., Nagasawa, T., and Kaisho, T.
  • Journal Title: Blood Volume: 120 Pages: 4733-4743
  • DOI: doi:10.1182/blood-2012-06-436527
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The Ets transcription factor Spi-B is essential for the differentiation of intestinal microfold cells (2012)
  • Author(s): Kanaya, T., Hase, K., Takahashi, D., Fukuda, S., Hoshino, K., Sasaki, I., Hemmi, H., Knoop, K. A., Kumar, N., Sato, M., Katsuno, T., Yokosuka, O., Toyooka, K., Nakai, K., Sakamoto, A., Kitahara, Y., Jinnohara, T., McSorley, S. J., Kaisho, T., Williams, I. R., and Ohno, H.
  • Journal Title: Nat Immunol Volume: 13 Pages: 729-736
  • DOI: doi:10.1038/ni.2352
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Visualization of Inflammasome Activation: Monitoring Caspase-1 Activation in Living Cells by a Genetically-encoded Probe SCAT1 (2012)
  • Author(s): Ting Liu
  • Organizer: 第35回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 福岡
  • Year and Date: 20121210-20121214
• [Presentation] IkB-zeta-deficiency in epitherial cells elicits Sjogren's syndrome-like autoimmune disease (2012)
  • Author(s): Atsushi Okuma
  • Organizer: 第41回日本免疫学会学術集会
  • Place of Presentation: 神戸
  • Year and Date: 20121205-20121207
• [Presentation] Long-term memory T cell response induced by adjuvant role of iNKT cells (2012)
  • Author(s): Kanako Shimizu
  • Organizer: 第41回日本免疫学会学術集会
  • Place of Presentation: 神戸
  • Year and Date: 20121205-20121207
• [Presentation] Spi-B is critical for plasmacytoid dendritic cell development in bone marrow (2012)
  • Author(s): Izumi Sasaki
  • Organizer: 第41回日本免疫学会学術集会
  • Place of Presentation: 神戸
  • Year and Date: 20121205-07
• [Presentation] Analysis of in vivo function of XC chemokine receptor-expressing dendritic cells (2012)
  • Author(s): Masanaka Sugiyama
  • Organizer: 第41回日本免疫学会学術集会
  • Place of Presentation: 神戸
  • Year and Date: 20121205-07
• [Presentation] In vivo roles of XC chemokine receptor 1-expressing dendritic cells (2012)
  • Author(s): Masanaka Sugiyama
  • Organizer: International Endotoxin and Innate Immunity Society Meeting 2012
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 20121023-26
• [Presentation] Roles of an Ets family transcription factor, Spi-B, in plasmacytoid dendritic cell development in the bone marrow (2012)
  • Author(s): Izumi Sasaki
  • Organizer: International Endotoxin and Innate Immunity Society Meeting 2012
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 20121023-20121026
• [Presentation] IkB-zeta-deficient Mice Develop Sjogren's syndrome-like Chronic Inflammation Caused by Dysregulation of Epitherial Homeostasis (2012)
  • Author(s): Atsushi Okuma
  • Organizer: International Endotoxin and Innate Immunity Society Meeting 2012
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 20121023-20121026