2010 Fiscal Year Annual Research Report
siRNAによる気道リモデリング制御方法の検討及び創薬の可能性の検討
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22590859
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| Research Institution | Mie University |
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Principal Investigator |
小林 哲 三重大学, 医学附属病院, 助教 (20437114)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
GABAZZA Esteban 三重大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (00293770)
田口 修 三重大学, 大学院・医学系研究科, 准教授 (90197244)
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| Keywords | 肺線維症 / siRNA / RNAi / TGF-β / 線維芽細胞 |
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| Research Abstract |
本研究の概要は、現在のところ画期的な治療法が存在しない呼吸器疾患病態に対して、その責任遺伝子、蛋白に対するsiRNAを用いて、それらをノックダウンすることによって、その病態を制御しようとするものである。しかしながら、現在siRNAに関する原理を含む基本特許は欧米に取得されており、このままの状態では日本においてsiRNA創薬は困難な状況となっている。そこで、我々は、RNAを一部改変することによって、これらの特許を回避し、日本独自の創薬を目指すものである。既に申請者らは、経気道的に導入したsiRNAについて、線維化に関与するTGF、PDGF、CTGF、MCP-1などをtargetに検討を開始しており、まずはTGFをターゲットとした肺線維症の抑制効果を検討した。ブレオマイシン肺線維症マウスモデルを作製し全例気管挿管下にてsiRNAを投与した。BALFを施行し、その細胞分画、サイトカイン濃度などを測定し、肺の摘出後、線維化指標であるAshocroft scoreを含めた組織学的評価を行った。コラーゲンマーカー、α-SMA等もimmunofluorescence stainingにて視覚的に検討した。そこで、肺線維症の抑制効果を確認したため、次にヒトTGFを肺に発現させたTransgenic mouseを作製した。作製マウスは生存した。組織学的には肺のみに線維化を認め、ヒト型肺線維症モデルの作製に成功した。このモデルに対し、以前と同様に経気道的にヒトTGFに対するsiRNAを作製したものを投与し、肺線維症の改善を認めた。今後、治療薬開発のためにさらに実験を進めていく予定である。
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