2010 Fiscal Year Annual Research Report
ヒト腎臓由来iPS細胞を用いたNF-kappaB制御による新規腎臓再生療法の検討
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22590878
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
高瀬 敦 東京大学, 医学部附属病院, 特任助教 (60265684)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
菱川 慶一 東京大学, 医学部附属病院, 特任准教授 (50255460)
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| Keywords | 腎臓上皮細胞由来iPS細胞 / 皮膚線維芽細胞由来iPS細胞 / NF-kappaB / siRNA Knockdown処置 / 特異的分化 |
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| Research Abstract |
ヒト腎臓上皮細胞由来iPs(hR-iPS)細胞におけるNF-κB活性化、またNF-κB制御による未分化維持・分化誘導について、ヒト皮膚線維芽細胞由来iPS(hF-iPS)細胞と比較して検討した。
両iPS細胞は共にEMSAにてNF-κB活性化を認めた。またfeeder細胞とb-FGFを無くした通常血清培地での培養7日目(分化系ips細胞)においてNF-κB活性はいずれも低下していた。その際の分化、未分化因子に関してはWestern blotにてOct3/4、NANOGの未分化因子は通常iPS細胞では発現増加を認め、WT-1、Pax-2の分化因子の発現は認めなかった。逆に分化系iPS細胞では未分化因子の発現は認めず、分化因子の発現増加を認めた。以上よりNF-κB活性はiPS細胞の未分化・分化能に働いている可能性が示唆された。そこでNF-κBを制御するためiPS細胞にNF-κB p65 siRNA処置を行った。siRNA処置にてiPS細胞のNF-κBをKnockdownする事が可能で、その際の未分化因子の発現は抑制され、逆に分化因子の発現増加を認めた。hR-iPS細胞とhF-iPS細胞との比較検討において、hR-iPS細胞の方が腎臓系の分化系因子の発現が強かった。
ここまでの研究において、NF-κB活性はiPS細胞の未分化維持に必要である事を見出した。またiPS細胞源基の由来元細胞により分化因子の発現に違いがあった事より、エピジェネティックの概念を考慮するとiPS細胞は由来元細胞系により強く特異的分化する傾向にある事も見出した。この研究成果は、iPS細胞の未分化維持・分化誘導研究に新たな進展を導き、今後の臨床研究に繋がるものと考える。
これらの成果の一部を2010年、2011年の日本腎臓学会学術総会、2010年の日本再生医療学会総会、日本高血圧学会総会にて報告した。
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