小児特発性ネフローゼ症候群における新規バイオマーカーの確立

2011 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 22591196
• Research Institution: National Research Institute for Child Health and Development
• Principal Investigator: 伊藤 秀一 独立行政法人国立成育医療研究センター, 腎臓・リウマチ・膠原病科, 医長 (20336572)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 今留 謙一 独立行政法人国立成育医療研究センター, 母児感染研究部・感染防御研究室, 室長 (70304780) ; 阿部 淳 独立行政法人国立成育医療研究センター, 免疫アレルギー研究部・免疫療法研究室, 室長 (40281688)
• Keywords: 小児特発性ネフローゼ症候群 / バイオマーカー / リンパ球 / 共刺激分子 / CD40 / CD40ligand / 可溶性CD30

Research Abstract

本研究は、小児特発性ネフローゼ症候群の疾患活動性の評価、予後、薬剤反応性の予測等を可能とするバイオマーカーの確立と病態の解明を目的とする。
一昨年度は、12名の患者で本症の初発時と寛解時に、TおよびBリンパ球上の各種共刺激分子の発現を調べた。その結果、治療開始前の初発時では、CD4陽性Tリンパ球上のCD40Lの発現率は34.4%であったが、ステロイド薬使用下の寛解時は13.3%に有意に減少した(P<0.05)。さらに、CD40については、治療開始前の初発時では、CD19陽性B細胞状上のCD40の発現率は93.9%であったが、ステロイド薬使用下の寛解時は79.0%に有意に減少した(P<0.05)。昨年度は、この12名の患者の臨床経過を追跡調査し、これらのマーカーが頻回再発やステロイド依存性などの難治化・重症化を予測しうる指標となるかを検討した。しかし、結果としてこれらの指標の多寡による難治化・重症化の予測はできなかった。しかし、CD40LやCD40が本症の疾患活動性や病態に関与することはこれまでに報告はなく、本症の病態の解明に新たな示唆を与えるものである。
さらに昨年度は、リンパ球上の共刺激分子である可溶性CD30(sCD30)のバイオマーカーとしての有用性を検証した。その結果、血漿中sCD30はネフローゼ症候群の初発時およびステロイド投与後の寛解時は(n=13)、それぞれ70.1±27ng/ml、27.1±19.9ng/ml(P=0.0004)であり明らかな有意差を認めた。また、正常コントロール(n=20)とステロイド非使用の寛解中のネフローゼ症候群(n=17)では、25.9±10.9ng/ml 25.6±11.9ng/ml、であり,それぞれネフローゼ初発時と有意差を認め(P=0.00025,P=0.00026)、sCD30が本症の疾患活動期にのみ上昇することが判明した。この発見はこれまで報告のないものであり、CD40分子同様に、TおよびBリンパ球の相互活性化が本症の病態に関与する事実を示すものである。
本年度はBリンパ球のCD40の下流のシグナルの活性化を、Western blot、RT-PCRで検討する。また、可溶性CD30についても、予後の予測が可能となるバイオマーカーかどうかの検証を行う。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

小児特発性ネフローゼ症候群の疾患活動性を反映する分子をこれまでに3つ(B細胞上のCD40、T細胞上のCD40ligand、血漿中の可溶性CD30)を発見した。これらは従来の報告にない新たな発見である。今後、これらのマーカーの下流のシグナル伝達の解明を進める。

Strategy for Future Research Activity

1)可溶性CD30分子についても、頻回再発やステロイド依存性ネフローゼ症候群などの難治化・重症化を予測しうる指標となるかを、患者の経過を前方視的に観察し検討する。
2)末梢血単核球におけるCD40の下流のシグナルの活性化を、Western blotにより検討し、本症におけるB細胞の活性化の機序について解明することを試みているが、現在条件設定と適切な抗体の選択を行っている段階である。
3)昨年、数名の初発患者で末梢血単核球を用いたマイクロアレーの解析を行ったところ、本症の急性期にインターフェロン関連の遺伝子発現が上昇している患者を数名認めた。本事象が一般的な事象であるかを症例を重ね検討する。さらに急性期患者血清を培養細胞に添加しインターフェロン関連分子の発現やその遺伝子の発現が増強するかを検討する。本症においてインターフェロンの検討を行った報告は少ないため、本症の疾患機序の一端の解明につながる可能性がある。

Research Products

• [Journal Article] Pediaiatric liver-kidney transplantation for hepatorenal fibrocystic disease from a living donor (2012)
  • Author(s): Sakamoto S, Kasahara M, Fukuda A, Tanaka H, Kakiuchi T, Karaki C, Kanazawa H, Kamei K, Ito S, Nakazawa A
  • Journal Title: Pediatr Transplantation Volume: 16 Pages: 99-102
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Characterization of Epstein-Barr virus (EBV)-infected cells in EBV-associated hemophagocytic lymphohistiocytosis in two patients with X-linked lymphoproliferative syndrome type 1 and 2. (*contributed equally to this work) (2012)
  • Author(s): Imadome K*, Yang X*, Wada T*, Nishida N, Mukai T, Fujiwara M, Kawashima H, Kato F, Fujiwara S, Yachie A, Zhao X, Miyawaki T, Kanegane H
  • Journal Title: Herpesviridae Volume: 10 Pages: 1
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Sequential monitoring of plasma EBV-DNA level in a patient with EBV-positive Hodgkin lymphoma (2012)
  • Author(s): Uchida E, Honma R, Igarashi A, Kurata M, Imadome K, Omoto E, Miura O, Arai A
  • Journal Title: Rinsho Ketsueki Volume: 53 Pages: 87-91
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Recurrence of chronic active epstein-barr virus infection from donor cells after achieving complete response through allogeneic bone marrow transplantation (2012)
  • Author(s): Arai A, Imadome K, Wang L, Wu N, Kurosu T, Wake A, Yamamoto H, Ota Y, Harigai M, Fujiwara S, Miura O
  • Journal Title: Intern Med Volume: 51 Pages: 777-782
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Long-TermResults of a Randomized Controlled Trial in Childhood IgA Nephropathy (2011)
  • Author(s): Kamei K, Nakanishi K, Ito S, Saito M, Sako M, Ishikura K, Hataya H, Honda M, Iijima K, Yoshikawa N; for the Japanese Pediatric IgA Nephropathy Treatment Study Group
  • Journal Title: Clin J Am Soc Nephrol Volume: 6 Pages: 130-137
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Maintenance therapy with MMF after rituximab in pediatric patients with steroid-dependent nephrotic syndrome (2011)
  • Author(s): Ito S, Kamei K, Ogura M, Sato M, Fujimaru T, Ishikawa T, Udagawa T, Iijima K
  • Journal Title: Pediatr Nephrol Volume: 26 Pages: 1823-1828
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Preoperative dialysis for liver transplantation of methylmalonic acidemia (2011)
  • Author(s): Kamei K, Ito S, Shigeta T, Sakamoto S, Fukuda A, Horikawa R, Saito O, Muguruma T, Nakagawa S, Iijima K, Kasahara M
  • Journal Title: Ther Apher Dial Volume: 15 Pages: 488-492
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Superior mesenteric artery syndrome : risk factor for duodenal involvement in Henoch-Schonlein purpura (2011)
  • Author(s): Harada T, Kaneko T, Ito S, Hataya H, Nariai A, Mori M, Yokota S
  • Journal Title: Pediatr Int Volume: 53 Pages: 630-633
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] GI involvement of sigmoid mucosal erosion in a 13-year-old girl with microscopic polyangiitis (2011)
  • Author(s): Harada T, Ito S, Sasaki T, Kunisaki R, Shiojima H, Ogawa M, Yokota S
  • Journal Title: Gastrointest Endosc Volume: 74 Pages: 937-939
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] gender, and body length effects on reference serum creatinine levels determined by an enzymatic method in Japanese children : a multicenter study (2011)
  • Author(s): Uemura O, Honda M, Matsuyama T, Ishikura K, Hataya H, Yata N, Nagai T, Ikezumi Y, Fujita N, Ito S, Iijima K, Kitagawa T
  • Journal Title: Clin Exp Nephrol Volume: 15 Pages: 694-699
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Autoantibodies to villin occur frequently in IPEX, a severe immune dysregulation, syndrome caused by mutation of FOXP3 (2011)
  • Author(s): Kobayashi I, Kubota M, Yamaada M, Tanaka H, Ito S, Sasahara Y, Whitesell L, Ariga T
  • Journal Title: Clinical Immunology Volume: 141 Pages: 83-89
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Identification of FOXP3-negative regulatory T-like CD(4)+CD25(+)CD127 (low)) cells in patients with immune dysregulation. polyendocrinopathy, enteropathy (2011)
  • Author(s): Otsubo K, Kanegane H, Kamachi Y, Kobayashi I, Tsuge I, Imaizumi M, Sasahara Y, Hayakawa A, Nozu K, Iijima K, Ito S, Horikawa R, Nagai Y, Takatsu K, Mori H, Ochs H, Miyawaki T
  • Journal Title: X-linked syndrome Volume: 141 Pages: 111-120
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Cyclophosphamide followed by Mizoribine as maintenance therapy against refractory steroid dependent nephrotic syndrome (2011)
  • Author(s): Ito S, Ikeda H, harada T, Kamei K, Takahashi E
  • Journal Title: Pediatr Nephrol Volume: 26 Pages: 1921-2
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Living-donor liver transplantation using hyper-reduced graft for a neonatal fulminant hepatic failure (2011)
  • Author(s): Sasaki K, Kasahara M, Fukuda A, Kimura T, Shigeta T, Tanaka H, Nakagawa S, Ito S, Nakagawa A
  • Journal Title: Pediatr Int Volume: 53 Pages: 247-248
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Successful treatment with rituximab and donor lymphocyte infusions for fulminant EBV-associated lymphoproliferative disease that developed 14 years after unrelated BMT (2011)
  • Author(s): Kawaguchi T, Tsukamoto S, Ohwada C, Takeuchi M, Muto T, Tanaka S, Sakai S, Takeda Y, Abe D, Sakaida E, Shimizu N, Yokote K, Iseki T, Imadome K, Nakaseko C
  • Journal Title: Bone Marrow Transplantation Volume: 31 Pages: 1-3
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Clonal origin of Epstein-Barr virus (EBV)-infected T/NK-cell subpopulations in EBV-positive T/NK-cell lymphoproliferative disorders of childhood (2011)
  • Author(s): Ohga S, Ishimura M, Yoshimoto G, Miyamoto T, Takada H, Tanaka T, Ohshima K, Ogawa Y, Imadome K, Abe Y, Akashi K, Hara T
  • Journal Title: J Clin.Virol. Volume: 51 Pages: 31-37
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Clinical features of adult-onset chronic active Epstein-Barr virus infection : a retrospective analysis (2011)
  • Author(s): Arai A, Imadome K, Watanabe Y, Yoshimori M, Koyama T, Kawaguchi T, Nakaseko C, Fujiwara S, Miura O
  • Journal Title: Int J Hematol Volume: 93 Pages: 602-609
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Epstein-Barr Virus Induces 1 Erosive Arthritis in Humanized Mice (2011)
  • Author(s): Kuwana Y, Takei M, Yajima M, Imadome K, Inomata K, Shiozaki M, Ikumi N, Nozaki N, Shiraiwa H, Kitamura N, Takeuchi J, Sawada S, Yamamoto N, Shimizu N, Ito M, Fujiwara S
  • Journal Title: PLoS One Volume: 6 Pages: 26630-26634
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Novel Mouse Xenograft Models Reveal a Critical Role of CD4+ T Cells in the Proliferation of EBV-Infected T and NK Cells (¶Corresponding author) (2011)
  • Author(s): Imadome K¶, Yajima M, Arai A, Nakazawa A, Kawano F, Ichikawa S, Shimizu N, Yamamoto N, Morio T, Ohga S, Nakamura H, Ito M, Miura O, Komano J, Fujiwara S
  • Journal Title: PLoS Pathogens Volume: 7 Pages: 1002326-1002340
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Increased production of vascular endothelial growth factor-D and lymphangiogenesis in acute Kawasaki disease (2011)
  • Author(s): Ebata R, Abe J, Yasukawa K, Hamada H, Higashi K, Suwazono Y, Saito H, Terai M, Kohno Y
  • Journal Title: Circulation J Volume: 75 Pages: 1455-1462
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 小児期発症難治性ネフローゼに対するリツキシマブ治療の可能性 (2011)
  • Author(s): 伊藤秀一
  • Journal Title: 日本小児腎臓病学会雑誌 Volume: 24 Pages: 156-157
• [Journal Article] 難治性ネフローゼ症候群におけるリツキシマブの恩恵骨合併症の見地から (2011)
  • Author(s): 小椋雅夫, 亀井宏一, 堤晶子, 野田俊輔, 佐藤舞, 藤丸拓也, 石川智朗, 宇田川智宏, 伊藤秀一
  • Journal Title: 日本小児腎臓病学会雑誌 Volume: 24 Pages: 34-35
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] ガイドラインでみる小児CKDの診療 (2011)
  • Author(s): 伊藤秀一
  • Journal Title: 日本医事新報 Volume: 4574(解説) Pages: 80-86
• [Presentation] 我が国の小児急性血液浄化療法の実態調査 (2011)
  • Author(s): 伊藤秀一, 佐古まゆみ, 斎藤真梨, 佐藤舞, 藤丸拓也, 小椋雅夫, 亀井宏一
  • Organizer: 第33回日本小児腎不全学会学術集会
  • Place of Presentation: 焼津
  • Year and Date: 2011-10-21
• [Presentation] 小児期発症難治性ネフローゼに対するリツキシマブ治療の可能性 (2011)
  • Author(s): 伊藤秀一
  • Organizer: 第25回九州ネフロロジー研究会
  • Place of Presentation: 柳川
  • Year and Date: 2011-07-30
• [Presentation] Treatment for Refractory Nephrotic Syndrome ; Other Immunosuppressive Drugs (2011)
  • Author(s): Ito S
  • Organizer: The 11th Asian Congress of Pediatric Nephrology
  • Place of Presentation: Fukuoka, Japan
  • Year and Date: 2011-06-02
• [Presentation] National survey of rituximab treatment for childhood idiopathic nephritic syndrome (2011)
  • Author(s): Ito S, Kamei K, Udagawa T, Ogura M, Fujimaru T, Ishikawa T, Sato M, Fujinaga S, Iijima K
  • Organizer: The 11th Asian Congress of Pediatric Nephrology
  • Place of Presentation: Fukuoka, Japan
  • Year and Date: 2011-06-02
• [Presentation] Efficacy of Maintenance Therapy with Mycophenolate Mofetil after Rituximab for Steroid-Dependent Nephrotic Syndrome (2011)
  • Author(s): Ito S, Udagawa T, Ogura M, Mayumi S, Kamei K, Iijima K
  • Organizer: Pediatric Academic Societies and Asian Sodiety for Pediatric Research Joint Meeting
  • Place of Presentation: Denver, USA
  • Year and Date: 2011-05-02