婦人科癌のプラチナ耐性獲得の機序解明とアネキシンA4を標的とした新規癌治療法の確立

2011 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 22591854
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 榎本 隆之 大阪大学, 医学系研究科, 准教授 (90283754)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 藤田 征巳 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (60303963) ; 吉野 潔 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (90362730) ; 上田 豊 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (10346215) ; 木村 敏啓 大阪大学, 医学系研究科, 助教 (90584524)
• Keywords: 子宮体癌 / 卵巣癌 / AnnexinA4 / 蛋白質 / トランスポーター

Research Abstract

卵巣明細胞癌や子宮内膜癌で高頻度に発現し、プラチナ系抗癌剤耐性に関わっていることが示されているAnnexin A4のプラチナ系抗癌剤耐性機序を明らかにすることを目的とした。Annexin A4を中等度発現している子宮内膜癌細胞株HEC1細胞株にRNAiを導入し、Annexin A4の発現を抑制し、シスプラチン・カルボプラチンによる50%阻害濃度(IC50)への影響を解析した。HEC1細胞株でRNAiによりAnnxeinA4の発現を抑制したところ、両剤ともにIC50値の減少を認め、またAnnexin A4の強制発現株においては両剤ともにIC50の有意な上昇を認めた。Annexin A4によって制御されるプラチナ排出に関与するトランスポーターとしてタンパク質Aを同定した。また細胞内プラチナ定量ではAnneinA4発現株では有意に細胞内蓄積量が減少した。Annexin A4が子宮内膜癌におけるプラチナ系抗癌剤耐性に関与している機序を初めて示した。将来、Annexin A4をターゲットとした分子標的薬がプラチナ系耐性の克服につながる可能性が示唆された。
一方、子宮体癌細胞株および子宮内膜不死化細胞株を用い、アビジンカラムにて細胞膜蛋白のみを凝縮し、網羅的蛋白質発現解析を行った。同定された365個の蛋白のうち、18%が膜貫通ドメインを有する蛋白であった。正常細胞と癌細胞で発現に差がある膜蛋白として同定したNCAM1およびCLDN4について、細胞株を用いたwestern blottingおよびフローサイトメトリーにて癌細胞表面特異的に発現していることを確認した。手術検体を用いた免疫組織化学染色でも、CLDN4は癌組織において特異的に発現が上昇していることを確認した。NCAM1およびCLDN4は抗体医薬の標的として報告されている分子であるため、現在、これらの機能解析を現在行っている。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

Annexin A4の薬剤耐性の機序として解析を行ったところ、トランスポーターが与することが判明し、初めて報告した。

Strategy for Future Research Activity

Annexin A4の薬剤耐性に関わる機序をさらに解明していく。今回同定されたトランスポーターとともに、Annexin A4の特異的構造が関与する可能性について解析を進めていく予定である。
またNCAM1やCLDN4の薬剤耐性機序についてもさらに解析を進めていく。

Research Products

• [Journal Article] Salvage chemotherapy for ovarian carcinoma recurring during or after of onsolidation chemotherapy with paclitaxel (2011)
  • Author(s): Miyoshi Y, Ueda Y, Morimoto A, Yokoyama T, Matsuzaki s, Kobayashi E, Kimura T, Yoshino K, Fujita M, Enomoto T, Kimura T
  • Journal Title: Anticancer Res Volume: 31 Pages: 4613
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Salvage chemotherapy for recurrent or persistent clear cell carcinoma of the ovary : a single-institution experience for a series of 20 patients (2011)
  • Author(s): Yoshino K, Enomoto T, Fujita M Ueda Y, Kimura T, Kobayashi E, Tsutsui T, Kimura T
  • Journal Title: Int J Clin Oncol Volume: (印刷中)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Investigating the relative efficacies of combination chemotherapy of paclitaxel/carboplatin, with or without anthracycline, for endometrial carcinoma (2011)
  • Author(s): Fujiwara K, Egawa-Takata T, Ueda Y, Kimura T, Yoshino K, Fujita M, Miyatake T, Ohta Y, Kamiura S, Enomoto T, Kimura T
  • Journal Title: Arch Gynecol Obstet Volume: (印刷中)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] HB-EGF and PDGF mediate reciprocal interactions of carcinoma cells with cancer-associated fibroblasts to support progression of uterine cervical cancers (2011)
  • Author(s): Murata T, Mizushima H, Chinen I, Moribe H, Yagi S, Hoffman RM, Kimura T, Yoshino K, Ueda Y, Enomoto T, Mekada E
  • Journal Title: Cancer Res Volume: 71 Pages: 6633
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Targeting SRC in mucinous ovarian carcinoma (2011)
  • Author(s): Matsuo K, Nishimura M, Bottsford-Miller JN, Huang J, Komurov K, Armaiz-Pena GN, Shahzad MM, Stone RL, Roh JW, Sanguino AM, Lu C, Im DD, Rosenshien NB, Sakakibara A, Nagano T, Yamasaki M, Enomoto T, Kimura T, Ram PT, Schmeler KM, Gallick GE, Wong KK, Frumovitz M, Sood AK
  • Journal Title: Clin Cancer Res Volume: 17 Pages: 5367
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Chemotherapy for endometrial carcinoma (GOGO-EM1 study) : TEC (paclitaxel, epirubicin, and carboplatin) is an effective remission-induction and adjuvant therapy (2011)
  • Author(s): Egawa-Takata T, Ueda Y, Kuragaki C, Miyake T, Miyatake T, Fujita M, Yoshino K, Nakashima R, Okazawa M, Tsutsui T, Morishige K, Kimura T, Yamasaki M, Nishizaki T, Nagamatsu M, Ito K, Asada M, Ogita K, Wakimoto A, Yamamoto T, Nishio Y, Enomoto T
  • Journal Title: Cancer Chemother Pharmacol Volume: 68 Pages: 1603
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Recurrent endometrial carcinoma : prognosis for patients with recurrence within 6 to 12 months is worse relative to those relapsing at 12 months or later (2011)
  • Author(s): Miyake T, Ueda Y, Egawa-Takata T, Matsuzaki S, Yokoyama T, Miyoshi Y, Kimura T, Yoshino K, Fujita M, Yamasaki M, Enomoto T, Kimura T
  • Journal Title: Am J Obstet Gynecol Volume: 204 Pages: 535
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Questionnaire survey of the current status of radical trachelectomy in Japan (2011)
  • Author(s): Sato S, Aoki D, Kobayashi H, Saito T, Nishimura R, Nagano T, Yaegashi N, Enomoto T, Kigawa J
  • Journal Title: Int J Clin Oncol Volume: 16 Pages: 141
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 子宮内膜癌におけるAnnexin A4の発現とプラチナ系抗癌剤耐性の機序解明 (2011)
  • Author(s): 松崎慎哉
  • Organizer: 第70回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋国際会議場(愛知)
  • Year and Date: 2011-10-04
• [Presentation] Annexin A4は既知の薬剤トランスポーターを介して卵巣明細胞腺癌のプラチナ系薬剤耐性に関与する (2011)
  • Author(s): 金雅子
  • Organizer: 第63回日本産科婦人科学会学術講演会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場(大阪)
  • Year and Date: 2011-08-30
• [Presentation] 子宮内膜癌の新規標的分子の探索 (2011)
  • Author(s): 横山拓平
  • Organizer: 第63回日本産科婦人科学会学術講演会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場(大阪)
  • Year and Date: 2011-08-30
• [Presentation] 子宮内膜癌におけるAnnexin A4の発現とプラチナ系抗癌剤耐性の機序解明 (2011)
  • Author(s): 松崎慎哉
  • Organizer: 第63回日本産科婦人科学会学術講演会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場(大阪)
  • Year and Date: 2011-08-29
• [Presentation] Quantitative proteomic analysis of cell-surface membrane proteins : Biomarker discovery in endometrial cancer (2011)
  • Author(s): 横山拓平
  • Organizer: American Association Cancer Research
  • Place of Presentation: アメリカ合衆国
  • Year and Date: 2011-04-06