2010 Fiscal Year Annual Research Report
RNA解析による顔面神経麻痺の超早期予後診断法の開発-表情筋針生検材料を用いて-
| Project/Area Number |
22591884
|
|---|
| Research Institution | Ehime University |
|---|
Principal Investigator |
羽藤 直人 愛媛大学, 大学院・医学系研究科, 准教授 (60284410)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
脇坂 浩之 愛媛大学, 大学院・医学系研究科, 准教授 (30304611)
|
|---|
| Keywords | 顔面神経 / 神経切断 / 神経挫滅 / マイクロアレイ法 / RNA解析 |
|---|
| Research Abstract |
顔面神経障害の程度や時期により表情筋の遺伝子発現に差があるとすれば、これを指標とした顔面神経麻痺の病態診断に応用できる可能性がある。本研究では、実験動物の顔面神経に「切断と挫滅」という2種類の障害を負荷し、その後に生ずる遺伝子発現の変化を経時的に観察した。実験動物には10週齢、雄のウィスター系ラットを用いた。右側の耳後部を切開して側頭骨外で顔面神経を露出、茎乳突口から約5mmの部位に次のいずれかの障害を加えた。すなわち、神経を完全に切断し末梢側を5mmにわたって切除した神経切断モデル(以下、切断群)と、マイクロ持針器を用いて10分間圧迫を加えた神経挫滅モデル(以下、挫滅群)の2種類を作製した。これらの処置後、経時的に眼瞼やヒゲの動きを肉眼的に観察し、表情運動の評価を行った。また、マイクロアレイ法を用いて顔面表情筋における遺伝子発現を検討した。その結果両群とも処置直後より眼瞼やヒゲの動きが消失し、完全麻痺を呈した。切断群では28日を過ぎても表情運動が回復しなかったのに対し、挫滅群は10日目頃より徐々に表情運動が回復し、平均17.6±2.8日で治癒に至った。ENoG値は処置後7日目の切断群で0%、挫滅群で5.8±2.4%であった。マイクロアレイ解析の結果、計26,835個のラット遺伝子の発現データを得た。切断群、挫滅群のコントロール群に対する変化割合が2倍以上増加したRNAの数は、検査時期によらず切断群は挫滅群よりも多く、その差は28日目で最も顕著であった。今後、顔面表情筋におけるRNA発現の定量評価や局在評価を行う予定である。
|
