2012 Fiscal Year Annual Research Report
口腔癌幹細胞と癌の微小環境（ニッチ）におけるＭＭＰおよびＡＤＡＭの役割検討
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22592030
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| Research Institution | 独立行政法人国立長寿医療研究センター |
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Principal Investigator |
中村 博幸 独立行政法人国立長寿医療研究センター, 再生歯科医療研究部, 副部長 (30542253)
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| Project Period (FY) |
2010-04-01 – 2013-03-31
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| Keywords | 癌幹細胞 / TIMP3 / MMP / ADAM |
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| Research Abstract |
本研究では、口腔癌幹細胞ニッチで幹細胞性維持に関わるプロテアーゼについて、癌増殖・浸潤・転移に重要でかつ細胞外マトリックスに高い分解活性を持つMMPとADAMにターゲットを絞って解析する。これらのプロテアーゼファミリーに特異的なインヒビター(TIMP-3およびAlaTIMP-3)を発現するトランスジェニックマウスを用いて、どのプロテアーゼが癌幹細胞のニッチからの離脱に関わるのかを生体内で明らかにする。昨年度作製したCAGプロモーターを用いたTIMP-3およびAlaTIMP-3発現トランスジェニックマウスではトランスジーンを持つ全ての細胞で発現が観察されなかった。つまり発現遺伝子を持ちながらタンパクの発現がない細胞が多く観察された。これまでCAGプロモーターは細胞の種類によっては働かないことが報告されていたため、本年度はCAGプロモーターの代わりにユビキチンCプロモーターを用いてTIMP-3およびAlaTIMP-3を発現するトランスジェニックマウスを作製した。トランスジーンは、TIMP-3またはAlaTIMP-3の下流にリボゾームスキップ活性をもつ2AペプチドとmCherrey遺伝子を挿入しこの蛍光タンパクをサロゲートマーカーとして使用できるように作製した。このトランスジーンを胚にインジェクトし2系統のTIMP-3発現マウスと、3系統のAlaTIMP-3発現マウスを樹立した。実際のTIMP-3、AlaTIMP-3タンパクの発現の確認はI型コラーゲンプロモーター調節下にCreリコンビナーゼを発現するマウスと交配することにより行った。その結果、今回作製した全てのマウスでmCherryの発現を確認した。さらにCAGプロモーターを用いたトランスジェニックマウスと異なり、マウス皮膚でほぼすべての線維芽細胞でmCherryの発現を確認した。
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| Current Status of Research Progress |
Reason
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(3 results)
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[Journal Article] The anti-inflammatory effects of matrix metalloproteinase-3 on irreversible pulpitis of mature erupted teeth.2012
Author(s)
Eba, H., Murasawa, Y., Iohara, K., Isogai, Z.,Nakamura, H., and Nakashima, M
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Journal Title
PloS one
Volume: 7
Pages: e52523
DOI
Peer Reviewed
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