2011 Fiscal Year Annual Research Report
転写因子Dec2とSoxファミリー蛋白の相互作用による軟骨分化制御機構
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22592067
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
藤本 勝巳 広島大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (40294566)
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| Keywords | 軟骨分化 / 転写因子 |
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| Research Abstract |
bHLH型転写因子Dec2の軟骨分化における役割を解明することを目的として、研究を進めている。これまでの研究結果から、軟骨分化に対してDec1は促進的に作用し、一方、Dec2は抑制的に作用することが分かってきた。そこで、Dec1,Dec2の転写制御メカニズムを明らかにするために以下の実験を行った。
まず最初に、Dec2とSox6およびSox9の相互作用について解析した。軟骨前駆細胞株であるATDC5を用いて免疫沈降法で解析したところ、Dec2はSox6と強く、Sox9とは弱く結合することを明らかにした。一方、Dec1はSox6,Sox9と結合しなかった。
次に、ルシフェラーゼアッセイを行い、II型コラーゲンおよびSox9遺伝子プ戸モーター活性に対するDec1,Dec2,Sox6,Sox9の影響について解析した。その結果、Sox9はII型コラーゲン遺伝子のプロモーター活性を促進したが、Sox6,Dec1,Dec2はII型コラーゲン遺伝子のプロモーター活性に影響しなかった。また、Sox9,Dec2はSox9遺伝子プロモーター活性を抑制した。しかし、Dec1はSox9遺伝子プロモーター活性に影響しなかった。さらに、Sox9遺伝子の上流領域を解析したところ、多数のSox応答配列が見つかった。これらの実験結果から、Dec2はSox9の発現を抑制することで軟骨分化に対して抑制的に働いていると考えられる。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
ほぼ当初の研究計画通りに研究が進んでいる。具体的には、Dec2とSox蛋白との相互作用を証明した。また、プロモーターアッセイ等の分子レベルの解析を行うことで、Dec2の作用機序が明らかになりつつある。
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| Strategy for Future Research Activity |
今回の実験結果から想定される転写制御メカニズムを検証するために、今後クロマチンレベルでの解析の必要があると考えている。そこで、Sox9遺伝子の発現調節領域におけるDec2蛋白の結合やヒストンのメチル化およびアセチル化に対するDec2の影響をクロマチン免疫沈降法で調べる予定である。
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Research Products
(11 results)
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[Journal Article] Basic helix-loop-helix transcription factors DEC1 and DEC2 regulate the paclitaxel-induced apoptotic pathway of MCF-7 human breast cancer cells2011
Author(s)
Wu, Y., Sato, F., Bhawal, U.K., Kawamoto, T., Fujimoto, K., Noshiro, M., Morohashi, S., Kato, Y., Kijima, H
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Journal Title
Int. J. Mol. Med.
Volume: 27(4)
Pages: 491-495
DOI
Peer Reviewed
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