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2010 Fiscal Year Annual Research Report

細胞間情報交換におけるストレス応答マイクロRNAの役割

Research Project

Project/Area Number 22592087
Research InstitutionNagasaki University

Principal Investigator

田代 茂樹  長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (20300882)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 佛坂 由可  長崎大学, 病院, 講師 (10244089)
片山 郁夫  長崎大学, 病院, 助教 (80295089)
角 忠輝  長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (80284701)
中村 卓  長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (30172406)
KeywordsマイクロRNA / 細胞間情報交換 / ギャップ結合 / ストレス応答 / cPLA2
Research Abstract

ストレス応答に関わる物質についてギャップ結合を介してのmiRNA(マイクロRNA)に求めた点は独創的な研究といえるのではないだろうか。miRNAはこれまで1個の細胞内での生物学的機序の同定は行われてきたが、細胞集団における働きは未だ認識されていない。最初に細胞を様々なストレス下に置くことにより発現が大きく変化するmiRNAを同定することを試み、その手掛かりを求めるため、アレイ法による既知のmiRNAの検索、さらにライブラリーを作製して網羅的に解析しようとした。しかし、量があまりにも膨大なのが問題となった。
以前に我々の研究室では、温熱ストレスに対する細胞の反応性を、ギャップ結合をポイントにして比べた事がある。その研究で分かったことは細胞は細胞間のコンタクトがなくなると途端に温熱に対する感受性が高くなるということである。この結果は我々が長年研究してきたcPLA2αの有無に依存した。よって、スクリーニングを試みる細胞はcPLA2αが欠損している細胞とその正常細胞を比較して用いることがその突破口になると考えた。
簡便なやり方としてsiRNAなどを用いる方法があるが、完全にノックアウト(KO)することはできず、ストレス応答の再現性に問題点が残る。よってcPLA2αのKOマウス由来の細胞を用いることが最善策であると考えた。以前、共同研究でcPLA2αのKOマウスを使ったことがあるが、継代することが因難で実験材料として使うには労力が大きく、相手の研究室への依存度が大きすぎる。従って、我々でconditional KOマウスを作製することにした。世界的にもこのようなマウスは存在せず、ソースとしての貢献も副産物として得られ、遠回りではあるが最も早く目的に近づく実験であると考えている。今年度は導入するTargeting vectorを作製した。次年度は共同研究して作製する。

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Published: 2012-07-19  

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