2010 Fiscal Year Annual Research Report
血管内皮細胞における骨吸収抑制因子OPGの新しいシグナル受容機構の解明
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22592097
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| Research Institution | Health Sciences University of Hokkaido |
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Principal Investigator |
小林 美智代 北海道医療大学, 歯学部, 助教 (80316265)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
千葉 逸朗 北海道医療大学, 歯学部, 教授 (50250460)
磯貝 恵美子 東北大学, 農学研究科, 教授 (80113570)
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| Keywords | オステオプロテゲリン / トロンビン / 血管内皮細胞 |
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| Research Abstract |
【目的】破骨細胞活性化抑制因子であるオステオプロテゲリン(OPG)は、動脈硬化や心疾患によりその血中濃度が上昇することが報告されている。我々は炎症存在下での血管とOPGの作用メカニズムを明らかにする目的で、血液凝固因子で炎症メディエーターでもあるトロンビンが、血管内皮細胞からのOPG産生に及ぼす作用について検討を行った。
【方法】ヒト皮膚微小血管内皮細胞(HMVEC)にトロンビンを添加し、18時間培養を行った。必要に応じてSrcキナーゼの阻害剤であるPP1およびERKの阻害剤であるU0126、PI3K阻害剤であるLY294002、PAR-1の阻害剤であるSCH79797でHMVECを30分間前処理行った後に、トロンビン共存下で培養した。培養上清中のOPG濃度はELISAにて測定した。さらに、OPGを囮レセプターとするRANKLとの相互作用を調べるために、HMVECをRANKL抗体で一時間前処理を行った後に、トロンビン共存下で培養し、炎症性サイトカインであるIL-6の産生をELISAにて測定した。
【結果および考察】トロンビンは濃度依存的に、HMVECからOPG産生を誘導した。LY294002、PP1およびSCH79797はトロンビンによるOPG産生を抑制した。しかし、U0126はトロンビンによるOPG産生誘導に影響を及ぼさなかった。さらに、RANKL抗体はHMVECからのトロンビンによるIL-6の産生誘導に関与しなかったが、OPGの添加はOPG濃度依存的にトロンビンによるIL-6の産生を増加させた。
【結論】本実験結果より、OPGの血中濃度上昇においてトロンビンが関与しており、その情報伝達経路にはPAR-1、SrcおよびPI3Kの活性が関与することが示唆された。さらに、RANKL非依存的に、OPGが血管内皮細胞から炎症性サイトカインを誘導している可能性が示唆された。
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