2011 Fiscal Year Annual Research Report
舌・咀嚼筋の老化による委縮時のmiRNAの役割と委縮予防法の探索
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22592171
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| Research Institution | Tsurumi University |
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Principal Investigator |
菅 武雄 鶴見大学, 歯学部, 講師 (40247333)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山根 明 鶴見大学, 歯学部, 教授 (20166763)
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| Keywords | miRNA / SDA-PAGE / Real-time PCR / in situ hybridization / 老齢マウス / 胎仔マウ / miR-1 / ミオシン重鎖 |
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| Research Abstract |
昨年度はReal-TimePCR法を用いた発現解析によりmiR-1が野生型マウスの咬筋の生後発達過程において増加していくことを示した。この結果はmiR-1がマウス咬筋の生後発達に何らかの役割を果たしていることを示唆している。この結果をふまえ本年度は、発生・発育過程において舌、咀嚼筋に特異的に発現しているmiRNA、特にmiR-1の筋組織内での分布を明らかにする以下の実験を行った胎齢12、13、14、15日のマウス胎仔より舌を摘出し、4%パラフォルムアルデヒドかプアンで固定した。Whole mount miRNA in situ hybridization法を用いて、摘出した舌全体におけるmiR-1の分布を解析した。舌標本のほぼ中央付近の凍結切片し、miRNA in situ hybridization法を用いて、筋線維内のmiR-1の分布を解析した。以上の実験から、miR-1は舌筋線維内に分布しており、舌筋の発生に伴い染色強度が上昇していることが示された。
くわえて老化にともなう舌、咀嚼筋の性質の変化を明らかにするために以下の実験を行った3、6、12、24ヶ月齢の野生型ラットを安楽死させ咬筋、オトガイ舌筋、オトガイ舌骨筋を摘出しRNA、蛋白質を分離した。老化に伴う筋特性変化を明らかにするためにSDS-PAGE、Real-time PCR法を用いて、これらの筋におけるミオシン重鎖の発現を解析した。しかし、ミオシン重鎖の蛋白質、mRNAの発現において加齢に伴う顕著な変化は観察されなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
in situ hybridization法を用いて咬筋の生後発達過程におけるmiR-1の筋線維内分布を明らかにする予定であった。しかし、胎仔の発達過程における分布は解析できたが、生後発達過程における解析はできなかった。これは試薬の筋組織内への浸透性など技術的な問題によると思われる。
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| Strategy for Future Research Activity |
骨格筋の本研究の最終的な目的は、miRNAの機能を促進または抑制する薬物を探求し、咀嚼筋の再生療法、筋萎縮を防止する薬物やサプリメントを開発するための基礎的なデータを得ることである。しかし、研究の達成度がやや遅れているため、今後はin situ hybridizationにより老化に伴うmiRNAの組織内分布およびAntisenseを用いてmiRNAの機能抑制のための実験条件の確立することを主眼として研究を遂行する。
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[Journal Article] Autophagic-lysosomal pathway functions in the masseter and tongue muscles in the klotho mouse, a mouse model for aging2011
Author(s)
IDA, R., KANEKO, S., SUGA, T., MORITO, M., YAMANE, A.
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Journal Title
Mol.Cell.Biochem.
Volume: 348
Pages: 89-98
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Bone morphogenetic protein-2 functions as a negative regulator, but not as an inducer for the formations of cartilage and bone in cultured tongue, in the differentiation of myoblasts in mouse embryonic tongue2011
Author(s)
AOYAMA, K., YAMANE, A., SUGA, T., SUZUKI, E., FUKUI, T., NAKAMURA, Y.
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Journal Title
BMC Dev.Biol.
Volume: 44
Pages: 11
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Changes in triacylglycerol-accumulated fiber type, fiber type composition, biogenesis in the mitochondria of the soleus muscle in obese rats2011
Author(s)
KANEKO, S., IIDA, R., SUGA, T., FUKUI, T., MORITO, M., YAMANE, A.
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Journal Title
Anat.Rec.
Volume: 294
Pages: 1904-1912
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] IGF and myostatin pathways are respectively induced during the earlier and the later stages of skeletal muscle hypertrophy induced by clenbuterol, a β2-adrenergic agonist
Author(s)
ABO, T., IIDA, R., KANEKO, S., SUGA, T., YAMADA, H., HAMADA, Y., YAMANE, A.
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Journal Title
Cell Biochem.Func.
Volume: (In press)
Peer Reviewed
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[Presentation] Cooperative functions of myostatin and IGF in the regulatory mechanism for the hypertrophy of rat masseter muscle induced with clenbuterol, a β2-adrenergic agonist2011
Author(s)
YAMANE, A., ABO, T., IIDA, R., SUGA, T., KANEKO, S., FUKUI, T.
Organizer
International Conference on Muscle Wasting 2001
Place of Presentation
Centro Stefano Franscini, Ascona, Switzerland
Year and Date
20110918-20110923
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[Presentation] Changes in the property of rat genioglossus, geniohyoid and masseter muscles in assoication with aging2011
Author(s)
YAMANE, A., KANEKO, S., IIDA, R., SUGA, T., MORITO, M.
Organizer
第43回日本分子生物学会年会
Place of Presentation
パシフィコ横浜、神奈川
Year and Date
2011-12-16
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