2012 Fiscal Year Annual Research Report
舌・咀嚼筋の老化による委縮時のｍｉＲＮＡの役割と委縮予防法の探索
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22592171
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| Research Institution | Tsurumi University |
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Principal Investigator |
菅 武雄 鶴見大学, 歯学部, 講師 (40247333)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山根 明 鶴見大学, 歯学部, 教授 (20166763)
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| Project Period (FY) |
2010-04-01 – 2013-03-31
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| Keywords | 舌 / miRNA / Antisense / Real-time PCR / In situ hybridization |
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| Research Abstract |
miRNA解析のためのin situ hybridization法とAntisense Morpholino OligonucleotideによるmiRNA機能抑制のための実験条件を確立した。
胎齢12、13、14、15日マウス胎仔マウスより舌を摘出し、4%パラフォルムアルデヒドで固定した。舌まるごとまたは舌の中央付近の凍結切片上でDIGラベルしたプローブを用いたin situ hybridization 法によりmiR-1の舌筋組織内の分布を解析した。また、マウス胎仔より舌を摘出し、BGJb培養液を用いて器官培養を行った。培養液にmiR-1に対するAntisense Morpholino Oligonucleotideを添加し２、４日間培養した。培養終了後、舌よりmiRNAを分離・精製し、Real-time PCR法を用いてmiR-1の発現量を計測することによりAntisenseの抑制効果を確認した。さらに筋分化マーカーであるmyoD、myogenin、muscle creatine kinase(MCK)のmRNA発現量を計測した。
in situ hybridization法によりマウス胎仔舌筋細胞においてmiR-1が発現していることが明らかになった。舌の器官培養系において、miR-1の発現量は培養2日目から4日目の間に増加した。Antisense処理はこのmiR-1の増加を抑制した。myogenin、MCKの発現量は培養2日目から4日目の間に増加した。しかし、Antisense処理によってもこの増加は抑制できなかった。以上の結果より、miRNA解析のためのin situ hybridization法とAntisense Morpholino OligonucleotideによるmiRNA機能抑制のための実験条件が確立できたことが示された。
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| Current Status of Research Progress |
Reason
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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Research Products
(5 results)
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[Journal Article] Role of occlusion in mouse masseter muscle acetylcholine receptor clustering2013
Author(s)
MORI, M., NARIYAMA, M., ABO, T., HIRAI, S., OGAWA, T., HAMADA, Y., YAMANE, A. and ASADA, Y.
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Journal Title
J. Dent. Res.
Volume: 92
Pages: 352-357
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] Age-related changes in rat genioglossus, geniohyoid, and masseter muscles2013
Author(s)
KANEKO, S., IIDA, R., SUGA, T., MORITO, M. and YAMANE, A.
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Journal Title
Gerodontology
Volume: 未定
Pages: 未定
DOI
Peer Reviewed
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[Journal Article] IGF and myostatin pathways are respectively induced during the earlier and the later stages of skeletal muscle hypertrophy induced by clenbuterol, a b2-adrenergic agonist2012
Author(s)
ABO, T., IIDA, R., KANEKO, S., SUGA, T., YAMADA, H., HAMADA, Y. and YAMANE, A.
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Journal Title
Cell Biochem. Func.
Volume: 30
Pages: 671-676
DOI
Peer Reviewed
