2010 Fiscal Year Annual Research Report
顎関節の炎症性病態に関与するmicroRNAの解析
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22592230
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| Research Institution | Nihon University |
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Principal Investigator |
近藤 壽郎 日本大学, 松戸歯学部, 教授 (70178416)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小倉 直美 日本大学, 松戸歯学部, 講師 (10152448)
阿久津 美和 日本大学, 松戸歯学部, 助教 (10523524)
伊藤 耕 日本大学, 松戸歯学部, 助手 (20419758)
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| Keywords | 顎関節内障 / microRNA / interleukin-1 / 滑膜細胞 / TargetScan / microRNA標的遺伝 |
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| Research Abstract |
microRNA (miRNA)は、ゲノムにコードされたsmall RNAで、自身と塩基配列相補性を示すmessenger RNA (mRNA)の3'非翻訳部位に結合することにより,翻訳を制御するといわれている。今回、我々は、ヒト顎関節滑膜細胞(滑膜細胞)をinterleuki-1β(IL-1β)で刺激した時に発現変動するmicroRNAを網羅的に解析した。【方法】日本大学松戸歯学部倫理に関する指針に従い、顎関節内障患者から顎関節滑膜組織を採取し、Out growth法にて培養ヒト顎関節滑膜細胞を得た。滑膜細胞にIL-1β刺激を6時間行った細胞および無刺激の細胞をTrizol Reagentで細胞を可溶化後、AGPC法を用いてtotal RNAを抽出した。microRNA発現量はmiRXplore^<TM> Microarray kitを用いて測定した。発現変動が認められたmicroRNAの標的遺伝子はTargetScan databaseを用いて検索した。【結果および考察】約800のヒトmature miRNAの発現量について調べたところ、無刺激の細胞に比べIL-1β刺激細胞で発現強度が2倍以上の変動が認められたのは、7miRNAであった。up-regulateしたのは1miRNA、down-regulateしたのは6 miRNAであった。最も発現低下したのはhas-miR-612で、無刺激時に比べて約117に発現量が低下していた。この標的遺伝子をTargetScanで調べたところ、で約200遺伝子が候補にあがった。候補遺伝子中には転写因子であるSP1が認められた。MCP-1のpromoter領域にはSP1 binding siteが存在することから,IL-1βはhas-miR-612発現を低下させることにより、MCP-1遺伝子発現を制御している可能性が示唆された。
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Research Products
(1 results)
