2011 Fiscal Year Annual Research Report
歯周組織再生を制御する細胞外マトリックスと転写因子の発現調節機構
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22592319
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| Research Institution | Nihon University |
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Principal Investigator |
小方 頼昌 日本大学, 松戸歯学部, 教授 (90204065)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中尾 寿美 日本大学, 松戸歯学部, 助手 (20102577)
高井 英樹 日本大学, 松戸歯学部, 助教 (30453898)
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| Keywords | 歯周組織再生 / 細胞外マトリックス / 転写因子 / 骨シアロタンパク質 / 石灰化 / 骨芽細胞 / 発現調節 / 遺伝子プロモーター |
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| Research Abstract |
骨芽細胞様細胞(ROSl7/2.8)を、0.01または0.1μg/mlのP.gingivalis(P.g.)およびA.actinomycetemcomitans(A.a.)LPSで刺激後、骨シアロタンパク質(BSP)のmRNA量の変化をノーザンプロットで検索した。0.01μg/mlのP.g.およびA.a.LPSはBSPmRNA量を経時的に増加させ、0.1μg/mlのP.g.およびA.α LPSはBSPmRNA量を減少させた。ルシフェラーゼアッセイにてBSPの転写に対する両LPSの影響を検索し、BSP遺伝子プロモーターと核内タンパク質との結合をゲルシフトアッセイで検索した。ルシフェラーゼアッセイの結果、0.01μg/mlのP.g.LPSは、pLUC3(-116～+60)の転写活性のみを上昇させた。一方、0.01μ9/mlのA.a LPSは、pLUC3、pLUC4(-424～+60)、pLUC5(-801～+60塩基対)の転写活性を上昇させた。0.1μg/mlのP.g.およびA.a LPSは、pLUC3、pLUC4、pLUC5の転写活性を減少させた。0.01および0.1μg/mlのA.a LPSによるpLUC3の転写活性の上昇と減少は、チロシンリン酸化、ERK1/2、PI3キナーゼ、活性酸素阻害剤で抑制された。0.01および0.1μg/mlのP.g. LPSによるpLUC3の転写活性の上昇と減少は、チロシンリン酸化、ERK1/2および活性酸素阻害剤で抑制された。0.01と0.1μg/mlのP.g. LPSは、CREおよびFRE配列と核内タンパク質との結合を経時的に増加または減少させた。0.01と0.1μg/mlのA.a LPSは、CRE、FRE、HOX配列に対する核内タンパク質の結合を経時的に増加または減少させた。
以上の結果、0.01Fg/mlのP.g. LPSとA.a. LPSは、BSPの遺伝子発現を増加させ、0.1μg/mlのP.g. LPSとA.a. LPSは、BSPの遺伝子発現を減少させた。また、両LPSの効果は同一ではなく、異なる細胞内情報伝達系を介してBSPの遺伝子発現を調節すると考えられた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
石灰化組織特異的に発現する骨シアロタンパク質(BSP)に対するサイトカイン、成長因子および歯周病誘発因子(LPS等)の効果を検索し、良好な結果が得られており、下記に示す様な学会発表および論文の発表を行った。以上の結果は、歯周病による骨吸収およびその後の歯周組織再生にとって有用な情報源となると考えられることから、研究は"おおむね順調に進展している"と考えられる。
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| Strategy for Future Research Activity |
次年度が最終年度であるため、歯周組織再生を制御する細胞外マトリックスの中でBSPに焦点を絞り、骨芽細胞の分化に重要と考えられる転写因子との関係を検索したいと考える。研究は順調であり、問題は無いと考える。
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Research Products
(5 results)
