2010 Fiscal Year Annual Research Report
RNAアプタマーを用いた魚類ウイルス感染症の治療法の開発
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22658059
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| Research Institution | Tokyo University of Marine Science and Technology |
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Principal Investigator |
青木 宙 東京海洋大学, 海洋科学技術研究科, 特任教授 (00051805)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
廣野 育生 東京海洋大学, 海洋科学技術研究科, 教授 (00270926)
近藤 秀裕 東京海洋大学, 海洋科学技術研究科, 准教授 (20314635)
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| Keywords | RNAアプタマー / 魚類病原ウイルス / ウイルス性出血性敗血症 / Rhodovulum sulfidophilum / SELEX法 |
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| Research Abstract |
RNAアプタマーは、ウイルスやタンパク質を標的物質として特異的に結合し、抗体に代わる分子認識が可能な生体物質として注目を浴びている。RNAアプタマーを有効利用して魚類病原ウイルスに対する治療あるいは予防が出来ないかどうかを検討した。各種の魚病ウイルスに対するRNAアプタマーを検出し、次に、これらのRNAアプタマーを沿岸や養殖場の汚泥に生息する海洋性光合成細菌(Rhodovulum sulfidophilum)を使って大量生産することを試みた。魚類ウイルス病:ウイルス性出血性敗血症の起因ウイルスに対するRNAアプタマーをSELEX (Systematic evolution of ligands by exponential enrichment)法(試験管内人工進化法)を用いて作出した。生産したRNAアプタマーが魚類病原性ウイルスに対し強い親和性が認められ、分子標的薬として有効であることが確認できた。次いで、RNA分子を逆転写、PCR反応で、相補的なDNAを合成した。菊池らが開発したプラスミドベクターpHSR2にこのDNAを組み込み、組換えプラスミドDNAをR.sulfidophilumに形質転換した。形質転換株は、培地中に魚病ウイルスに親和性のあるRNAアプタマーを大量に生産した。RNAアプタマーを化学合成ではなく、海洋細菌を使用することにより、大量に生産することを、可能とした。現在、RNAアプタマー産生するR.sulfidophilumを用いて魚類ウイルス感染症:ウイルス性出血性敗血症に対する防御効果をin vivoで検討中である。
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