2010 Fiscal Year Annual Research Report
正常ネコに存在する抗インスリン自然自己抗体の臨床的意義
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22658099
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| Research Institution | Gifu University |
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Principal Investigator |
北川 均 岐阜大学, 応用生物科学部, 教授 (70144003)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大場 恵典 岐阜大学, 応用生物科学部, 准教授 (20377691)
西飯 直人 鳥取大学, 農学部, 講師 (20508478)
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| Keywords | 抗インスリン自然自己抗体 / ネコ / 抗原認識部位 |
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| Research Abstract |
1) 抗インスリン自然自己抗体を定量するためのサンドイッチELISAを開発し、その精度を検討した結果、抗インスリン結合IgGを十分に測定できることが確認された。この測定法を使用して、成イエネコ130例および他のネコ科動物11例について血漿抗インスリンIgG濃度を測定した。すべての検体から80～4884μg/mlの抗インスリンIgGが検出された。抗インスリンIgG濃度は、痩せ型のネコにおいて高く、また、総IgG濃度と正の相関関係にあったが、血糖値や血漿中性脂肪濃度とは無関係であった。疾病ネコについては、現在サンプルを収集中である。
2) 新生児ネコから継時的に採血し、抗インスリン自己抗体の変化をELISAにより測定した。臍帯血には、抗インスリンIgGはほとんど存在せず、哺乳後に抗インスリンIgG濃度が上昇した。この抗インスリン移行抗体は、哺乳期間中に徐々に減少したが、食物が乳からキャットフードに変わる時期に抗体濃度が上昇した。
3) ウシインスリンをカラムに固定し、ネコ血清を流すことでネコ抗インスリン自己抗体を結合させ、溶出液のPHの変化等によるアフィニティークロマトグラフィーを行った。各分画の抗インスリン自己抗体に対してプレートに結合させたウシインスリンの部分ペプチドを競合させ、抗原認識部位を決定(エピトープマッピング)した。抗原認識部位は、A鎖およびB鎖の両端の親水性の高い部位であることが推定された。
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