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2011 Fiscal Year Annual Research Report

抗糖鎖抗体作製のための新しいストラテジーとその応用

Research Project

Project/Area Number 22659018
Research InstitutionUniversity of Shizuoka

Principal Investigator

川島 博人  静岡県立大学, 薬学部, 准教授 (50260336)

Keywordsリンパ球ホーミング / L-セレクチン / 高内皮細静脈 / 硫酸化糖鎖 / 抗糖鎖抗体
Research Abstract

糖鎖の機能を解明するためには特定の糖鎖に特異的な抗糖鎖抗体は極めて有用なツールとなるが、糖鎖は一般に抗原性が低いために、抗糖鎖抗体の作製は容易ではない。本研究で我々は、抗糖鎖抗体を作製するための効率の良い方法論の樹立を行うともに、得られた抗糖鎖抗体を用いてリンパ球ホーミングにおける硫酸化糖鎖の機能解析を行い、以下の研究成果を得た。
1.硫酸基転移酵素二重遺伝子欠損マウス(DKOマウス;Kawashima et al., Nature Immunology,6:1096-1104,2005)を硫酸基転移酵素強制発現株で免疫する新しい方法論に基づいて、二種類の抗硫酸化糖鎖モノクローナル抗体S1およびS2を樹立した。
2.S1およびS2抗体はともに野生型マウスの高内皮細静脈(HEV)と特異的に結合するのに対して、DKOマウスのHEVとは結合せず、硫酸化糖鎖を特異的に認識すると考えられた。さらに糖鎖アレイを用いた解析の結果、S1,S2抗体はともにリンパ球ホーミングレセプター・L-セレクチンのリガンドとして知られている6-スルホシアリルルイスXおよびその構造からフコースを除去した6-スルホシアリルLacNAcに特異的に結合することが明らかとなった。
3.S1,S2抗体を用いて、リンパ球ホーミングアッセイおよびin vitroローリングアッセイを行ったところ、S2抗体はS1抗体よりも強く阻害作用を示すことがわかった。また、その阻害作用の違いはS1抗体は硫酸化O-型糖鎖に選択的に結合するのに対して、S2抗体は硫酸化O-型および硫酸化N-型糖鎖の双方に結合することに起因することがわかった。
以上より、抗糖鎖抗体作製のための新しい方法論の樹立に成功し、得られた抗体を用いて硫酸化O-型糖鎖と硫酸化淋型糖鎖の双方が協調的にリンパ球ホーミングに関与することが明らかとなった。

  • Research Products

    (10 results)

All 2012 2011 Other

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (7 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Binding of L-selectin to its vascular and extravascular ligands is differentially regulated by pH2011

    • Author(s)
      Hirose M, Matsumura R, Sato K, Murai T, and Kawashima H
    • Journal Title

      Biochem. Biophys. Res. Commun

      Volume: 414 Pages: 437-442

    • DOI

      DOI:10.1016/j.bbrc.2011.09.123

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Essential role of peripheral node address in in lymphocyte homing to nasal-associated lymphoid tissues and allergic immune responses2011

    • Author(s)
      Ohmichi Y, Hirakawa J, Imai Y, Fukuda M, Kawashima H
    • Journal Title

      J.Exp.Med.

      Volume: 208 Pages: 1015-1025

    • DOI

      doi:10.1084/jem.20101786

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] リンパ球ホーミングにおける高内皮細静脈ヘパラン硫酸の機能解析2012

    • Author(s)
      坪井康一郎、平川城太朗、關愛実子、今井康之、山口祐、福田穣、川島博人
    • Organizer
      日本薬学会第132年会
    • Place of Presentation
      札幌
    • Year and Date
      2012-03-29
  • [Presentation] Essential role of peripheral node addressin in lymphocyte homing to nasal-associated lymphoid tissues and allergic immune responses2012

    • Author(s)
      Ohmichi Y, Hirakawa J, Imai Y, Fukuda M, and Kawashima H
    • Organizer
      Keystone Symposia-Chemokines and Leukocyte Trafficking in Homeostasis and Inflammation
    • Place of Presentation
      Breckenridge, Colorado, USA
    • Year and Date
      2012-01-10
  • [Presentation] 各種SH3ドメインとN-WASPプロリンリッチ部位の相互作用の相違によりN-WASPのアクチンフィラメント形成と細胞運動の相違が生じる2011

    • Author(s)
      廣瀬まゆみ、川島博人、村井稔幸、川上和之、源利成、岡田雅人、末次志郎、竹縄忠臣、中川敦史
    • Organizer
      第63回日本細胞生物学会大会
    • Place of Presentation
      札幌
    • Year and Date
      20110627-20110629
  • [Presentation] Elevation of rat plasma P-selectin in acute lung injury2011

    • Author(s)
      Hirose M, Kawashima H, Murai T, Kawakami K, Minamoto
    • Organizer
      日本分子生物学会・第11回春季シンポジウム
    • Place of Presentation
      金沢
    • Year and Date
      20110525-20110526
  • [Presentation] Novel Anti-carbohydrate Antibodies Reveal the Cooperative Function of Sulfated N- and O-Glycans in Lymphocyte Homing2011

    • Author(s)
      Hirakawa J, Tsuboi K, Sato K, Imai Y, Kawashima H
    • Organizer
      第40回日本免疫学会
    • Place of Presentation
      千葉
    • Year and Date
      2011-11-29
  • [Presentation] 大腸特異的Atg7欠損マウスにおけるデキストラン硫酸誘発性大腸炎の解析2011

    • Author(s)
      坪井康一郎、高倉惇、今井康之、小松雅明、川島博人
    • Organizer
      第84回日本生化学会年会
    • Place of Presentation
      京都
    • Year and Date
      2011-09-24
  • [Presentation] 大腸特異的Atg7欠損マウスにおけるデキストラン硫酸誘発性大腸炎の増悪化2011

    • Author(s)
      坪井康一郎、高倉惇、今井康之、小松雅明、川島博人
    • Organizer
      第75回日本生化学会中部支部例会
    • Place of Presentation
      静岡
    • Year and Date
      2011-05-28
  • [Remarks]

    • URL

      http://sys.u-shizuoka-ken.ac.jp/~bisei/

URL: 

Published: 2013-06-26  

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