ヒトの肝臓を主座とする遺伝性疾患を有するマウスモデルの創生

2010 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 22659147
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 茶山 一彰 広島大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (00211376)
• Keywords: 肝臓学 / ノックアウトマウス / uPA scid mouse / 不死化肝細胞

Research Abstract

ヒトの遺伝性疾患は、ノックアウトマウスなどを使用して研究されていることが多い。しかし、マウスとヒトの病態は必ずしも同一ではなく、また、マウスで耐性致死であるために良好なモデルが作製できない場合も多い。また、ノックアウトマウスは作製に多大な時間と人手を要するため、わずかの違いを有するマウスを作製するのにも再度全く同じ手間を要する。本研究では、培養ヒト肝細胞に遺伝子導入することにより、ヒトの疾患と同様の状態の肝細胞を作製し、この細胞をuPA-scid mouseに移植することにより、遺伝病状態のヒト肝臓を有するマウスを作製することを目的として研究を行う。
本研究は、ヒト肝細胞で高度に置換されたマウスを作製することができる我々の技術的な利点によるところが大きい。uPA scid mouseは作製が困難であり、これを所有している施設は世界でも数カ所程度にとどまる。ヒト肝細胞をhTertを導入することにより不死化し、その際にヒトの疾患を起こすのと同じ変化を引き起こすDNA (dominant negative formあるいはshRNA発現ユニット)を同時に導入し、選択されたstable transfromantをuPA scid mouseに移植することにより、病的状態を維持したマウスを作製する。
本年度は、上記不死化肝細胞を作製する際に、dicystronicのconstractを構築し、これを導入した不死化肝細胞株を樹立する。得られた細胞株をuPA scid mouseに導入し病的状態に類似したヒト肝細胞を有するマウスモデルを作製している。

Research Products

• [Journal Article] Amino acid substitutions in core and NS5A regions of the HCV genome can predict virological decrease with pegylated interferon plus ribavirin therapy. (2010)
  • Author(s): Kitamura S, Tsuge M, Hatakeyama T, Abe H, Imamura M, Mori N, Saneto H, Kawaoka T, Mitsui F, Hiraga N, Takaki S, Kawakami Y, Aikata H, Takahashi S, Ohishi W, Ochi H, Hayes CN, Chayama K
  • Journal Title: Antivir Ther Volume: 15(8) Pages: 1087-1097
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Predictive value of the IL28B polymorphism on the effect of interferon therapy in chronic hepatitis C patients with genotypes 2a and 2b. (2010)
  • Author(s): Kawaoka T, Hayes CN, Ohishi W, Ochi H, Maekawa T, Abe H, Tsuge M, Mitsui F, Hiraga N, Imamura M, Takahashi S, Kubo M, Tsunoda T, Nakamura Y, Kumada H, Chayama K
  • Journal Title: J Hepatol Volume: 54(3) Pages: 408-414
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] HCV substitutions and IL28B polymorphisms on outcome of peg-interferon plus ribavirin combination therapy. (2010)
  • Author(s): Hayes CN, Kobayashi M, Akuta N, Suzuki F, Kumada H, Abe H, Miki D, Imamura M, Ochi H, Kamatani N, Nakamura Y, Chayama K.
  • Journal Title: Gut Volume: 60(2) Pages: 261-267
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Accumulation of refractory factors for pegylated interferon plus ribavirin therapy in older female patients with chronic hepatitis C (2010)
  • Author(s): Chayama K, Hayes CN, Yoshioka K, Moriwaki H, Okanoue T, Sakisaka S, Takehara T, Oketani M, Toyota J, Izumi N, Hiasa Y, Matsumoto A, Nomura H, Seike M, Ueno Y, Yotsuyanagi H, Kumada H.
  • Journal Title: Hepatol Res. Volume: 12 Pages: 1155-1167
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] IL-6-mediated intersubgenotypic variation of interfer on sensitivity in hepatitis C virus genotype 2a/2b chimeric clones (2010)
  • Author(s): Suda G, Sakamoto N, Itsui Y, Nakagawa M, Tasaka-Fujita M, Funaoka Y, Watanabe T, Nitta S, Kiyohashi K, Azuma S, Kakinuma S, Tsuchiya K, Imamura M, Hiraga N, Chayama K, Watanabe M.
  • Journal Title: Virology. Volume: 407(1) Pages: 80-90
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Prolongation of interferon therapy for recurrent hepatitis C after living donor liver transplantation : analysis of predictive factors of sustained virological response, including amino acid sequence of the core and NS5A regions of hepatitis C virus (2010)
  • Author(s): Kawaoka T, Hiraga N, Takahashi S, Takaki S, Mitsui F, Tsuge M, Nagaoki Y, Kimura Y, Hashimoto Y, Katamura Y, Hiramatsu A, Waki K, Imamura M, Kawakami Y, Aikata H, Tashiro H, Ohdan H., Chayama K.
  • Journal Title: Scand J Gastroenterol Volume: 45(12) Pages: 1488-1496
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Amino acid substitution in hepatitis C virus core region and genetic variation near the interleukin 28B gene predict viral response to telaprevir with peginterferon and ribavirin. (2010)
  • Author(s): Akuta N, Suzuki F, Hirakawa M, Kawamura Y, Yatsuji H, Sezaki H, Suzuki Y, Hosaka T, Kobayashi M, Kobayashi M, Saitoh S, Arase Y, Ikeda K, Chayama K, Nakamura Y, Kumada H.
  • Journal Title: Hepatology Volume: 52(2) Pages: 421-429
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] ITPA Polymorphism Affects Ribavirin-induced Anemia and Outcome of Therapy-a Genome-wide Study of Japanese HCV Patients. (2010)
  • Author(s): Ochi H, Maekawa T, Abe H, Hayashida Y, Nakano R, Kubo M, Tsunoda T, Hayes CN, Kumada H, Nakamura Y, Chayama K
  • Journal Title: Gastroenterology. Volume: 139(4) Pages: 1190-1197
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Cell culture and in vivo analyses of cytopathic hepatitis C virus mutants. (2010)
  • Author(s): Mishima K, Sakamoto N, Sekine-Osajima Y, Nakagawa M, Itsui Y, Azuma S, Kakinuma S, Kiyohashi K, Kitazume A, Tsuchiya K, Imamura M, Hiraga N, Chayama K, Wakita T, Watanabe M
  • Journal Title: Virology. Volume: 30;405(2) Pages: 361-369
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] common variation of IL28 affects gamma-GTP levels and inflammation of the liver in chronically infected hepatitis C virus patients. (2010)
  • Author(s): Abe H, Ochi H, Maekawa T, Hayes CN, Tsuge M, Miki D, Mitsui F, Hiraga N, Imamura M, Takahashi S, Ohishi W, Arihiro K, Kubo M, Nakamura Y, Chayama K.
  • Journal Title: J Hepatol. Volume: 53(3) Pages: 439-443
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Importance of serum concentration of adefovir for Lamivudine-adefovir combination therapy in patients with lamivudine-resistant chronic hepatitis B. (2010)
  • Author(s): Mitsui F, Tsuge M, Kimura T, Kitamura S, Abe H, Saneto H, Kawaoka T, Miki D, Hatakeyama T, Hiraga N, Imamura M, Kawakami Y, Aikata H, Takahashi S, Hayes CN, Igarashi H, Morimoto K, Shimizu M, Chayama K.
  • Journal Title: Antimicrob Agents Chemother Volume: 54(8) Pages: 3205-3211
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Long-term use of entecavir in nucleoside-naive Japanese patients with chronic hepatitis B infection. (2010)
  • Author(s): Yokosuka O, Takaguchi K, Fujioka S, Shindo M, Chayama K, Kobashi H, Hayashi N, Sato C, Kiyosawa K, Tanikawa K, Ishikawa H, Masaki N, Seriu T, Omata M.
  • Journal Title: J Hepatol Volume: 52(6) Pages: 791-799
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Differential effects of interferon and lamivudine on serum HBV RNA inhibition in patients with chronic hepatitis B. (2010)
  • Author(s): Huang YW, Chayama K, Tsuge M, Takahashi S, Hatakeyama T, Abe H, Hu JT, Liu CJ, Lai MY, Chen DS, Yang SS, Kao JH.
  • Journal Title: Antivir Ther Volume: 15(2) Pages: 177-184
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] HBx protein is indispensable for development of viremia in human hepatocyte chimeric mice. (2010)
  • Author(s): Tsuge M, Hiraga N, Akiyama R, Tanaka S, Matsushita M, Mitsui F, Abe H, Kitamura S, Hatakeyama T, Kimura T, Miki D, Mori N, Imamura M, Takahashi S, Hayes CN, Chayama K.
  • Journal Title: J Gen Virol Volume: 91(pt7) Pages: 1854-1864
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Practical Evaluation of a Mouse with Chimeric Human Liver Model for Hepatitis C Virus Infection Using an NS3-4A Protease Inhibitor. (2010)
  • Author(s): Kamiya N, Iwao E, Hiraga N, Tsuge M, Imamura M, Takahashi S, Miyoshi S, Tateno C, Yoshizato K, Chayama K.
  • Journal Title: J Gen Virol Volume: 91 Pages: 1668-1677
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Guidelines for the treatment of chronic hepatitis and cirrhosis due to hepatitis B virus infection for the fiscal year 2008 in Japan. (2010)
  • Author(s): Kumada H, Okanoue T, Onji M, Moriwaki H, Izumi N, Tanaka E, Chayama K, Sakisaka S, Takehara T, Oketani M, Suzuki F, Toyota J, Nomura H, Yoshioka K, Seike M, Yotsuyanagi H, Ueno Y ; The Study Group for the Standardization of Treatment of Viral Hepatitis Including Cirrhosis, Ministry of Health, Labor, Welfare of Japan.
  • Journal Title: Hepatol Res Volume: 40(1) Pages: 1-7
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] G to A hypermutation of TT virus. (2010)
  • Author(s): Tsuge M, Noguchi C, Akiyama R, Matsushita M, Kunihiro K, Tanaka S, Abe H, Mitsui F, Kitamura S, Hatakeyama T, Kimura T, Miki D, Hiraga N, Imamura M, Takahashi S, Hayses CN, Chayama K
  • Journal Title: Virus Res Volume: 149(2) Pages: 211-216
  • Peer Reviewed
• [Presentation] B型・C型肝炎合併CKD患者におけるステロイド薬、免疫抑制薬使用に関する考え方 (2010)
  • Author(s): 茶山一彰
  • Organizer: 第40回日本腎臓学会西部学術大会
  • Place of Presentation: 広島市(招待講演)
  • Year and Date: 20101008-20101009
• [Presentation] Hepatitis C Virus Replication and Response to Anti-viral Drugs in Human Hepatocyte Chimeric Mice (2010)
  • Author(s): 茶山一彰
  • Organizer: 第7回アジア太平洋肝臓病学会議(APASL)シングルトピックカンファレンス
  • Place of Presentation: 千葉市(招待講演)
  • Year and Date: 2010-12-17
• [Presentation] Personalized Medicine in Chronic Hepatitis B (2010)
  • Author(s): Chayama K
  • Organizer: TASL 2020 Single Topic Conference
  • Place of Presentation: 台北(招待講演)
  • Year and Date: 2010-08-22
• [Presentation] IL28の多型とC型慢性肝炎の炎症、繊維化、γGTPとの関連 (2010)
  • Author(s): 阿部弘美, 越智秀典, 柘植雅貴, 三木大樹, 光井富貴子, 平賀伸彦, 今村道雄, 高橋祥一, 茶山一彰
  • Organizer: 第46回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 山形市
  • Year and Date: 2010-05-28
• [Presentation] C型慢性肝炎患者に対するPegIFN/RBV療法の治療効果とIL28 locusのSNPおよび肝内IFN誘導遺伝子発現量の関連 (2010)
  • Author(s): 阿部弘美, 越智秀典, 柘植雅貴, 三木大樹, 光井富貴子, 平賀伸彦, 今村道雄, 高橋祥一, 茶山一彰
  • Organizer: 第46回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 山形市
  • Year and Date: 2010-05-28
• [Presentation] HCV関連ミラノ基準内肝細胞癌に対する根治治療後の予後 IFN効果とミラノ基準逸脱時期の検討を含めて (2010)
  • Author(s): 相方浩, 片村嘉男, 橋本義政, 長沖祐子, 河岡友和, 高木慎太郎, 平松憲, 脇浩司, 川上由育, 高橋祥一, 茶山一彰
  • Organizer: 第46回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 山形市
  • Year and Date: 2010-05-28
• [Presentation] 骨転移合併肝細胞癌に対するゾレドロン酸の効果 (2010)
  • Author(s): 片村嘉男, 相方浩, 長沖祐子, 石田友希, 橋本義政, 河岡友和, 高木慎太郎, 脇浩司, 平松憲, 高橋祥一, 茶山一彰
  • Organizer: 第46回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 山形市
  • Year and Date: 2010-05-28
• [Presentation] Angio-CTでは指摘されずGd-EOB DTPA造影MRI肝細胞相でのみ指摘される結節についての検討 (2010)
  • Author(s): 高木慎太郎, 橋本義政, 長沖祐子, 石田友希, 片村嘉男, 河岡友和, 柘植雅貴, 平松憲, 脇浩司, 今村道雄, 川上由育, 兵庫秀幸, 相方浩, 高橋祥一, 柿沢秀明, 福田浩, 堀口純, 永田靖, 茶山一彰
  • Organizer: 第46回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 山形市
  • Year and Date: 2010-05-28
• [Presentation] HBV RT領域の変異と核酸アナログ耐性への影響 (2010)
  • Author(s): 柘植雅貴, 今村道雄, 茶山一彰
  • Organizer: 第46回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 山形市
  • Year and Date: 2010-05-28
• [Presentation] HCV感染マウスを用いたプロテアーゼ阻害剤およびRNAポリメラーゼ阻害剤の抗ウイルス効果の検討 (2010)
  • Author(s): 平賀伸彦, 今村道雄, 岩尾英治, 柘植雅貴, 光井富貴子, 河岡友和, 茶山一彰
  • Organizer: 第46回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 山形市
  • Year and Date: 2010-05-28
• [Presentation] HBV感染ヒト肝細胞キメラマウスの血清中及び肝臓中cccDNA量の解析 (2010)
  • Author(s): 石田雄二, 眞田春美, 加国雅和, 島田卓, 茶山一彰, 立野知世
  • Organizer: 第46回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 山形市
  • Year and Date: 2010-05-27
• [Presentation] C型肝炎ウイルス感染におけるHLA DRB1とNKG2D遺伝子多型の影響 (2010)
  • Author(s): 大石和佳, 吉田健吾, 林奉権, 楠洋一郎, 藤原佐枝子, 柘植雅貴, 茶山一彰
  • Organizer: 第46回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 山形市
  • Year and Date: 2010-05-27
• [Presentation] 肝細胞癌に対するCDDP/LPDを用いた経カテーテル的化学塞栓術反復療法とステージングシステムについての検討 (2010)
  • Author(s): 河岡友和, 相方浩, 長沖祐子, 橋本義政, 石田友希, 片村嘉男, 光井富貴子, 石飛朋和, 高木慎太郎, 平賀伸彦, 柘植雅貴, 平松憲, 脇浩司, 今村道雄, 川上由育, 兵庫秀幸, 高橋祥一, 茶山一彰
  • Organizer: 第46回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 山形市
  • Year and Date: 2010-05-27
• [Presentation] 3cm以下単発、Child A肝細胞癌に対する肝切除とラジオ波焼灼療法の比較 (2010)
  • Author(s): 脇浩司, 相方浩, 長沖祐子, 石田友希, 橋本義政, 片村嘉男, 河岡友和, 高木慎太郎, 平松憲, 今村道雄, 川上由育, 高橋祥一, 田代裕尊, 大段秀樹, 茶山一彰
  • Organizer: 第46回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 山形市
  • Year and Date: 2010-05-27
• [Presentation] Genotype1b・高ウイルス量以外のC型慢性肝炎に対するResponse-guided therapy (2010)
  • Author(s): 北本幹也, 井川敦, 松本陽子, 山田博康, 川上由育, 茶山一彰
  • Organizer: 第46回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 山形市
  • Year and Date: 2010-05-27
• [Presentation] 慢性肝疾患に対する脾臓摘出術の効果と合併症 (2010)
  • Author(s): 田代裕尊, 艮雄一郎, 天野尋暢, 大下彰彦, 小林剛, 谷本新学, 黒田慎太郎, 田澤宏文, 相方浩, 高橋祥一, 茶山一彰, 浅原利正, 板本敏行, 大段秀樹
  • Organizer: 第46回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 山形市
  • Year and Date: 2010-05-27
• [Presentation] 非アルコール性脂肪性肝炎(NASH)における肝線維化と糖代謝異常の関連性について (2010)
  • Author(s): 石田友希, 兵庫秀幸, 石飛朋和, 鍋島由宝, 長沖祐子, 橋本義政, 片村嘉男, 河岡友和, 高木慎太郎, 脇浩司, 平松憲, 川上由育, 相方浩, 高橋祥一, 茶山一彰
  • Organizer: 第46回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 山形市
  • Year and Date: 2010-05-27
• [Presentation] NAFLDの肝線維化と血小板数の関係について (2010)
  • Author(s): 石飛朋和, 兵庫秀幸, 鍋島由宝, 石田友希, 茶山一彰
  • Organizer: 第46回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 山形市
  • Year and Date: 2010-05-27
• [Presentation] 肝移植後C型肝炎再燃に対するIFN治療の現況とSVR率改善のための検討 (2010)
  • Author(s): 河岡友和, 高橋祥一, 田代裕尊, 大段秀樹, 茶山一彰
  • Organizer: 第46回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 山形市
  • Year and Date: 2010-05-27
• [Presentation] C型慢性肝炎患者におけるILB28多型とウイルス側および宿主側因子との関連 (2010)
  • Author(s): 今村道雄, 越智秀典, 茶山一彰
  • Organizer: 第46回日本肝臓学会総会
  • Place of Presentation: 山形市
  • Year and Date: 2010-05-27
• [Presentation] B型慢性肝炎の治療 (2010)
  • Author(s): 茶山一彰
  • Organizer: 第96回日本消化器病学会総会
  • Place of Presentation: 新潟市
  • Year and Date: 2010-04-24
• [Presentation] MRIによる肝線維化の評価 (2010)
  • Author(s): 橋本義政, 高木慎太郎, 石井康隆, 川瀬理恵, 小酒慶一, 寺崎元美, 永井健太, 中土井鋼一, 野田育江, 村上英介, 宮木大輔, 長沖祐子, 石田友希, 片村嘉男, 平松憲, 脇浩司, 相方浩, 高橋祥一, 茶山一彰, 福田浩
  • Organizer: 第96回日本消化器病学会総会
  • Place of Presentation: 新潟市
  • Year and Date: 2010-04-24
• [Presentation] ミラノ基準内Child A、B肝細胞癌症例に対する肝切除、ラジオ波治療後の予後から見た肝移植適応時期の検討 (2010)
  • Author(s): 片村嘉男, 高橋祥一, 茶山一彰
  • Organizer: 第96回日本消化器病学会総会
  • Place of Presentation: 新潟市
  • Year and Date: 2010-04-24
• [Presentation] 当院における生体肝移植ドナーの術後経過および診療の現況 (2010)
  • Author(s): 高木慎太郎, 大段秀樹, 茶山一彰
  • Organizer: 第96回日本消化器病学会総会
  • Place of Presentation: 新潟市
  • Year and Date: 2010-04-23
• [Presentation] C型慢性肝炎に対するインターフェロン治療におけるILB28多型とCore領域変異の影響 (2010)
  • Author(s): 今村道雄, 越智秀典, 茶山一彰
  • Organizer: 第96回日本消化器病学会総会
  • Place of Presentation: 新潟市
  • Year and Date: 2010-04-23
• [Presentation] 肝外転移合併肝細胞癌に対するS1 based全身化学療法の検討 (2010)
  • Author(s): 相方浩, 片村嘉男, 橋本義政, 長沖祐子, 河岡友和, 高木慎太郎, 平松憲, 脇浩司, 川上由育, 高橋祥一, 茶山一彰
  • Organizer: 第96回日本消化器病学会総会
  • Place of Presentation: 新潟市
  • Year and Date: 2010-04-22
• [Presentation] in vitro, in vivoモデルを用いた多剤耐性HBVに対する抗ウイルス効果の検討 (2010)
  • Author(s): 柘植雅貴, 平賀伸彦, 茶山一彰
  • Organizer: 第96回日本消化器病学会総会
  • Place of Presentation: 新潟市
  • Year and Date: 2010-04-22
• [Remarks]
  • URL: http://home.hiroshima-u.ac.jp/naikal/
• [Remarks]
  • URL: http://home.hiroshima-u.ac.jp/nbard/biom/saisei.htm
• [Remarks]
  • URL: http://www.src.riken.go.jp/group/liver/index.html