婦人科腫瘍の癌幹細胞の同定とそれを標的とした新規治療法の開発の試み

2011 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 22659296
• Research Institution: University of Toyama
• Principal Investigator: 二階堂 敏雄 富山大学, 大学院・医学薬学研究部(医学), 教授 (50180568)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 吉田 淑子 富山大学, 大学院・医学薬学研究部(医学), 准教授 (00171421) ; 岡部 素典 富山大学, 大学院・医学薬学研究部(医学), 助教 (60283066) ; 小池 千加 富山大学, 大学院・医学薬学研究部(医学), 助教 (10523889) ; 中島 彰俊 富山大学, 大学院・医学薬学研究部(医学), 助教 (00436792)
• Keywords: 癌幹細胞 / 組織幹細胞 / 婦人科組織 / 幹細胞マーカー / 組織アレイ

Research Abstract

1)富山大医学部医倫理委員会の承認の下、附属病院及び関連病院の協力を得て、インフォームドコンセントが得られた患者より各疾患により手術時に摘出された癌組織のうち病理診断に支障のでない範囲で癌組織を採取した。病理標本にて癌の組織型を確認後、癌細胞を単離し、得られた癌細胞を、1)で得られたマーカー及び幹細胞マーカー(CD24,CD44,CD133)の組み合わせにより分画した。我々はすでに子宮頚部扁平上皮癌由来細胞株よりCD24+CD44+の分画にsphere形成能があることを見出しているので、各々の画分を解析した。その結果、CD24+SSEA4+細胞からsphereの形成能が高いことが明らかになった。またSphereの形成能が高い各分画は、幹細胞マーカー陽性であることが明らかになった。
2)婦人科癌幹細胞の癌再生能(分化能)を確認する。
得られた細胞を、Nudeマウスの皮下に移植し、癌再生能の有無を検討した。また、サイトケラチンサブタイプ、ビメンチン、幹細胞マーカーの発現について、オリジナルの癌組織と同様のパターンがみられるか否かをRT-PCR、免疫組織染色法にて解析した結果、移植した腫瘍においても、オリジナルの癌組織で見られた幹細胞マーカーの発現が明らかになった。
3)正常組織幹細胞マーカーを発現する細胞は母体となる組織の癌化過程においてその局在および数がいかに変化するか解析する。免疫組織染色法を用い、得られた正常幹細胞マーカーの発現陽性細胞数をカウントし、出現率を統計的に評価した。子宮頚部の扁平上皮癌、子宮内膜癌、卵巣癌の各組織間で比較検討した結果、子宮頚部の扁平上皮癌、子宮内膜癌、卵巣癌の各組織間で、幹細胞マーカーの発現が見られたが、共通に発現する癌幹細胞マーカーや特定の細胞表層マーカーは見いだされなかった。これらの結果より婦人科腫瘍に癌幹細胞の存在が明らかになり、婦人科腫瘍の新たな治療法の糸口が見出された。

Research Products

• [Journal Article] Clinical Application of a Hyperdry Amniotic Membrane on Surgical Defects of the Oral Mucosa (2012)
  • Author(s): Arai N., Tsuno H., Okabe M., Yoshida T., Koike C, Noguchi M., Nikaido T.
  • Journal Title: Oral Maxillofac Surg Volume: (in press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Establishment of Immortalized Human Amniotic Mesenchymal Stem Cells (2012)
  • Author(s): Teng Z., Yoshida T., Okabe M., Toda A., Higuchi O., Nogami M., Yoneda N., Zhou K., Kyo S., Kiyono T., Nikaido T.
  • Journal Title: Cell Transplant Volume: (in press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Isolation and characterization of human amniotic mesenchym al stem cells and their chondrogenic differentiation (2012)
  • Author(s): Nogami M., Tsuno H., Koike C., Okabe M., Yoshida T., Seki S., Matsui Y., Kimura T., Nikaido T.
  • Journal Title: Transplantation Volume: (in press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Use of a hyper-dried cross-linked amniotic membrane as initial therapy for corneal perforations (2011)
  • Author(s): Kitagawa K., Okabe M., Yanagisawa S., Zhang Xue-Yun., Nikaido T., Hayashi A.
  • Journal Title: Japanese J Ophthalmol Volume: 55 Pages: 16-21
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Effect of hyperdry amniotic membrane patches attached over the bony surface of mastoid cavities in canal wall down tymp anoplasty (2011)
  • Author(s): Shojaku H., Takakura H., Okabe M., Fujisaka M., Watanabe Y., Nikaido T
  • Journal Title: Laryngoscope Volume: 121(9) Pages: 1953-1957
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Cultured epithelial grafting using human amniotic membrane : the potential for using human amniotic epithelial cells as a cultured oral epithelium sheet (2011)
  • Author(s): Koike T., Yasuo M., Shimane T., Kobayashi H., Nikaido T., Kurita H
  • Journal Title: Arch Oral Biol Volume: 56(10) Pages: 1170-1176
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Traditional Japanese formula kigikenchuto accelerates healing of pressure-loading skin ulcer in rats (2011)
  • Author(s): Kimura M., Shibahara N., Hikiami H., Yoshida T., Jo M., Kaneko M., Mogami T., Fujimoto M., Goto H., Shimada Y.
  • Journal Title: eCAM Pages: 13
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Mechanisms of collagen fibril aligment in tendon injury : From tendon regeneration to artificial tendon (2011)
  • Author(s): Torigoe K, Tanaka HF., Yonenaga K., Ohkochi H., Miyasaka M., Sato R., Kusumaki T., Yoshida K., Yoshida T.
  • Journal Title: J Orhop Res Volume: 29 Pages: 1944-1950
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Hyaluronan tetrasaccharide promotes regeneration of peripher al nerve : in vivo analysis by film method (2011)
  • Author(s): Torigoe k., Tanak HF., Ohkochi H., Miyasaka M., Yamanokuchi H., Yoshida K, Yoshida T.
  • Journal Title: Brain Res Volume: 18 : 1385 Pages: 87-92
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] New dried human amniotic membrane is useful as a substitute for dural repair after skull base surgery (2011)
  • Author(s): Tomita T, Hayashi N, Okabe M, Yoshida T, Hamada H, Endo s, Nikaido T
  • Journal Title: Skull Base Volume: (in press)
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Reprogramming of human amniotic epithelial cells by Oct4 overexpression (2011)
  • Author(s): Nikaido T., Takeda Y., Koike C, Yoshida T., Okabe M.
  • Organizer: 第34回日本分子生物学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 20111213-20111216
• [Presentation] バイオプリンティングロボットの次世代化:血管自動認識ロボット (2011)
  • Author(s): 岡部素典, 荒井健一, 吉田淑子, 小池千加, 杉本潤, 戸田英樹, 後藤光昭, 中村真人, 二階堂敏雄
  • Organizer: 第49回日本人工臓器学会大会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 20111125-20111127
• [Presentation] インクジェット再生医工学:インクジェットによる再生医療の壁へのチャレンジ (2011)
  • Author(s): 中村真人, 荒井健一, 竹田朋恵, 渡辺有, 伊藤紘造, 戸田英樹, チャピゲンツィ, 岡部素典, 二階堂敏雄, 岩永進太郎
  • Organizer: 第49回日本人工臓器学会大会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 20111125-20111127
• [Presentation] インクジェット再生医工学:3次元生体組織の人工的設計と製作 (2011)
  • Author(s): 伊藤紘造, 荒井健一, 沖野賢志, 岩永進太郎, 戸田英樹, チャピゲンツィ, 二階堂敏雄, 中村真人
  • Organizer: 第49回日本人工臓器学会大会
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 20111125-20111127
• [Presentation] Application of Amnion Derived Cells to Tissue Engineering (2011)
  • Author(s): Koike C., Okabe M., Yoshida T., Toda H., Capi G., Nakamura M., Nikaido T
  • Organizer: International Conference on Biofabrication 2011 in TOYAMA
  • Place of Presentation: Toyama(Invited lecture)
  • Year and Date: 20111006-20111008
• [Presentation] 子宮頸癌における癌幹細胞の細胞表面マーカー (2011)
  • Author(s): 吉田淑子,齋藤滋,二階堂敏雄
  • Organizer: 第70回日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 名古屋
  • Year and Date: 20111003-05
• [Presentation] ヒト羊膜由来細胞の再生医療への応用 (2011)
  • Author(s): 二階堂敏雄, 吉田淑子, 岡部素典, 小池千加
  • Organizer: 第29回日本ヒト細胞学会学術集会
  • Place of Presentation: 富山
  • Year and Date: 20110820-20110821
• [Presentation] 脊髄損傷に対する不死化羊膜間葉系細胞の細胞治療材料としての有効性 (2011)
  • Author(s): 吉田淑子, 岡部素典, 吉田一晴, 小池千加, 周凱旋, 京哲, 清野透, 斎藤滋, 二階堂敏雄
  • Organizer: 第29回日本ヒト細胞学会学術集会
  • Place of Presentation: 富山
  • Year and Date: 20110820-20110821
• [Presentation] 不死化羊膜細胞の樹立と解析 (2011)
  • Author(s): 岡部素典, 吉田淑子, 小池千加, 斎藤滋, 二階堂敏雄
  • Organizer: 第29回日本ヒト細胞学会学術集会
  • Place of Presentation: 富山
  • Year and Date: 20110820-20110821
• [Presentation] 羊膜由来細胞のStemmnessの度合いの解析 (2011)
  • Author(s): 小池千加, 周凱旋, 岡部素典, 吉田淑子, 二階堂敏雄
  • Organizer: 第29回日本ヒト細胞学会学術集会
  • Place of Presentation: 富山
  • Year and Date: 20110820-20110821
• [Presentation] 羊膜間葉系幹細胞の単離・同定と軟骨分化に有効な成長因子の検討 (2011)
  • Author(s): 野上真紀子, 津野宏彰, Moustafa Fathy Omar, 小池千加, 岡部素典, 吉田淑子, 関庄二, 松井好人, 木村友厚, 二階堂敏雄
  • Organizer: 第29回日本ヒト細胞学会学術集会
  • Place of Presentation: 富山
  • Year and Date: 20110820-20110821
• [Presentation] 不死化羊膜上皮細胞の樹立と解析 (2011)
  • Author(s): 小池千加, 周凱旋, 吉田淑子, 岡部素典, 杉本潤, 斎藤滋, 清野透, 京哲, 二階堂敏雄
  • Organizer: 第32回日本炎症・再生医学会
  • Place of Presentation: 京都
  • Year and Date: 20110602-20110603
• [Presentation] 口腔扁平上皮癌細胞株における癌幹細胞の同定 (2011)
  • Author(s): 能登善弘, 吉田淑子, 小池千加, 岡部素典, 杉本潤, 津野宏彰, 野口誠, 二階堂敏雄
  • Organizer: 第32回日本炎症・再生医学会
  • Place of Presentation: 京都
  • Year and Date: 20110602-20110603