• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to project page

2011 Fiscal Year Annual Research Report

多光子励起顕微鏡によるin vivo観察法を用いた硬組織細胞間のネットワーク解析

Research Project

Project/Area Number 22659335
Research InstitutionTohoku University

Principal Investigator

若森 実  東北大学, 大学院・歯学研究科, 教授 (50222401)

Keywordsパッチクランプ法 / カプサイシン受容体 / TRPV1 / チャネル
Research Abstract

骨芽細胞と骨細胞は骨組織において神経細胞様にネットワークを形成し、骨への機械刺激やホルモン刺激に応答していると思われる。骨芽細胞や骨細胞の二次元培養と三次元培養が試みられているが、ネットワークの生理機能解明には至っていない。本研究ではGFP及び遺伝子ベースのCa^<2+>濃度指示タンパク質(GCaMP)を培養骨芽細胞様MC3T3細胞に発現させ細胞内Ca^<2+>濃度の上昇を指標にして機械刺激応答性を検討するとともに、Ca^<2+>濃度指示タンパク質の硬組織系での実用化の可能性を検討する。本年度はMC3T3細胞にG-CaMPをコードする遺伝子をリポフェクション法とリン酸カルシウム法で導入する最適条件の検討を行い、前者の方が効率的に遺伝子導入できることを確認した。イオノマイシン(Ca^<2+>イオノフォアー)を投与すると、G-CaMPはCa^<2+>蛍光指示薬fura-2同様に細胞内Ca2+濃度上昇に応答することを確認した。更に、G-CaMPを発現させたMC3T3-E1を伸縮可能なシリコンチャンバーに播種し、一軸方向への伸展刺激を負荷した時の[Ca^<2+>]_i変化を昨年度fura-2を用いて測定した結果と比較した。細胞内Ca2+濃度上昇を記録できるものの、まだ少しシグナルが弱いので、遺伝子導入方法の再検討が必要性であることが明らかになった。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

今年度初めは、震災の影響で研究が中断したが、その後、盛り返してきた。線虫や哺乳類の心筋細胞以外の骨細胞系でもGCaMPが使えることが判明したことは、大きな進展である。

Strategy for Future Research Activity

今年度はリポフェクション法やリン酸カルシウム法の他にエレクトロポレーション法でGCaMPを導入する予定である。また、改良型GCaMPも埼玉大学の中井博士と大倉博士から供与頂いている。

  • Research Products

    (5 results)

All 2012 2011

All Presentation (2 results) Book (3 results)

  • [Presentation] 鎮静薬ユージノールのTRPV1チャネルに対する効果2012

    • Author(s)
      吉田卓史、菊池尚、高橋かおり、若森実
    • Organizer
      第83回日本薬理学年会
    • Place of Presentation
      京都
    • Year and Date
      2012-03-16
  • [Presentation] 電位依存性カルシウムチャネルの生物物理学的解析2011

    • Author(s)
      若森実
    • Organizer
      新薬理学セミナー2011
    • Place of Presentation
      仙台(招待講演)
    • Year and Date
      2011-09-30
  • [Book] 歯学英和辞典(分担執筆、生理学・薬理学担当)2012

    • Author(s)
      若森実
    • Total Pages
      1-921
    • Publisher
      研究社
  • [Book] 現代歯科薬理学2012

    • Author(s)
      若森実
    • Total Pages
      14-24
    • Publisher
      医歯薬出版
  • [Book] Interface Oral Health Science 20112011

    • Author(s)
      Wakamori M, Yoshida T, Kikuchi T, Kondoh D, Komatsu M
    • Total Pages
      341-345
    • Publisher
      Springer

URL: 

Published: 2013-06-26  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi