2012 Fiscal Year Annual Research Report
化合物ライブラリーを用いたレドックス感受性イオンチャネルの機能解明に関する研究
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22681033
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
清中 茂樹 京都大学, 地球環境学堂, 准教授 (90422980)
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| Project Period (FY) |
2010-04-01 – 2013-03-31
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| Keywords | TRPチャネル / レドックス / カルシウムチャネル / ケミカルライブラリー |
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| Research Abstract |
昨年度までに酸化および還元で活性を示すTRPチャネル群を同定してきた。その中でも、TRPA1は酸素に応答するという興味深い性質を示した。そこで、マウスの細胞における分布をRT-PCRを用いて評価した。その結果、肺に投射する神経である迷走神経に発現していることを確認できた。迷走神経におけるTRPA1タンパク質の発現は、ウェスタンブロッティングからも評価した。
次に、迷走神経におけるTRPA1チャネルの機能について評価した。蛍光生Ca2+プローブであるFura2を用いたCa2+イメージングで評価したところ、高酸素だけでなく低酸素でもCa2+応答応答が見られることが確認できた。一方、TRPA1を欠損させたマウスから単離した迷走神経では酸素に対する応答が見られなかった。電気生理学的手法（パッチクランプ法）を用いた評価からも同様の結果が得られた。すなわち、迷走神経においても酸素の違いによりTRPA1が活性化されていることが確認できた。
動物（マウス）個体におけるTRPA1の意義については、外部の酸素分圧を変えた際のマウスの呼吸回数の変化について評価した。野生型マウスとTRPA1欠損マウスとで比較したところ、野生型マウスでは、高酸素下では呼吸回数が下がり低酸素下では呼吸回数が増加するという、酸素濃度に依存した呼吸回数の変動が確認できたが、TRPA1欠損マウスでは、そのような呼吸回数の変化が失われていた。すなわち、TRPA1が酸素濃度を感知する酸素センサーであることをマウス個体でも確認できたと言える。
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| Current Status of Research Progress |
Reason
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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| Strategy for Future Research Activity |
24年度が最終年度であるため、記入しない。
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