2010 Fiscal Year Annual Research Report
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22770051
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| Research Institution | The Institute of Physical and Chemical Research |
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Principal Investigator |
BREUER Christian 独立行政法人理化学研究所, 細胞機能研究ユニット, 国際特別研究員 (90525859)
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| Keywords | 細胞サイズ / 細胞伸長 / 転写因子 / トライヘリックス / シロイヌナズナ |
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| Research Abstract |
植物細胞は通常成長の過程で数倍から数十倍にまで拡大するが、葉や花の分泌細胞などの特殊な細胞の中には数百倍から数千倍にまで達するものもある。植物細胞の伸長生長がどのようにして終了し、細胞の最終的な大きさがいかに決定されるかという課題は、基礎・応用研究の両面において重要であるが、これらの過程を司る分子機構の全貌は未だ解明されていない。本研究では申請者が最近同定した細胞伸長抑制因子GT2-LIKE1(GTL1)の機能解析を通して、高等植物における細胞サイズの分子制御ネットワークを明らかにすることを目的としている。本年度はまず、GTL1の遺伝子発現を空間的・時間的に制御するシス配列を決定するために、GTL1プロモーターのdeletion analysisを行った。まず申請者がこれまで解析に用いてきた2kbのプロモーター領域を段階的に短縮し、GUSマーカーやGTL1 : GFPに連結するコンストラクトを作成して、シロイナズナの野生型もしくはgtl1変異体に導入した。これらの形質転換体を用いて、トライコーム形成の最終段階でのGTL1遺伝子の発現を規定するシス配列、またgtl1変異体の表現型を相補するために必要なシス配列を同定した。さらにGTL1に依存して転写量が変化する下流標的遺伝子を同定するため、まずDEX誘導性のpGTL1 : GTL1 : GRコンストラクトをgtl1欠損変異体に導入し、DEX依存的にgtl1の表現型を相補する形質転換体を選抜した。次にこれらの植物体にDEX処理してからRNAを抽出し、Affymetrix社のマイクロアレイを用いて遺伝子発現の比較解析を行った。DEX処理後24時間で発現量の変化する遺伝子が確認できたため、現在より早いタイムポイントでの遺伝子発現解析を進めている。
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