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2011 Fiscal Year Annual Research Report

赤外差スペクトル法によるイオン輸送蛋白質の分子機構解明

Research Project

Project/Area Number 22770159
Research InstitutionInstitute for Molecular Science

Principal Investigator

古谷 祐詞  分子科学研究所, 生命・錯体分子科学研究領域, 准教授 (80432285)

Keywords赤外分光法 / 時間分解計測 / 生体分子 / 蛋白質 / 生物物理
Research Abstract

界面を隔てた物質輸送・情報伝達を行う膜タンパク質は、方向性を持った構造変化を行うことで機能を発現している。しかしながら、計測手法の未整備から、それら膜タンパク質の構造変化の実態や、機能の発現との関連については不明な点が多い。本研究では、光受容タンパク質で活発に利用されている赤外差スペクトル法を、一般的なチャネルやポンプ等の膜タンパク質に適用する手法を開発し、タンパク質の構造変化と機能発現の分子機構の解明を目指す。具体的には以下の研究課題を提案する。(1)古細菌型ロドプシンの内部結合水の水素結合変化と機能との連関、(2)KcsAチャネルのpH依存的なチャネル開閉の分子機構、(3)V型ATPaseのNa^+イオン輸送とATP加水分解反応との連関。
平成23年度は、(1)に関係する研究課題として、各種古細菌型ロドプシンの時間分解赤外分光計測を行った。塩化物イオンポンプであるpHRについては、L1,L2,N-0中間体への遷移に伴う赤外差スペクトルを得た。Amide Aにアニオン種依存性が見られ、イオン輸送過程での段階的なタンパク質のコンフォメーション変化を明らかにした。プロトンポンプとして機能する古細菌型ロドプシンとして、プロトンの放出と取り込みの順序が異なるAR1(放出;後、取込;先)とAR2(放出;先、取込;後)を比較解析した。その結果、amide I領域で両者に異なる構造変化が見られた。(2),(3)に関連する課題を遂行するため、前年度に導入したストップトフロー装置を組み込んだ全反射型赤外分光法の開発を継続して行った。データの積算などのプログラムを改善し、pHRのC1^-イオンやCO_3^-イオン結合に伴う構造変化を40ms程度の時間分解能で計測することが可能であることを確認した。

  • Research Products

    (16 results)

All 2012 2011

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (12 results)

  • [Journal Article] 全反射赤外分光法による膜タンパク質の構造機能相関研究の現状と展望2011

    • Author(s)
      古谷祐詞
    • Journal Title

      化学と工業

      Volume: 64巻 Pages: 694-695

  • [Journal Article] Chimeric Microbial Rhodopsins Containing the Third Cytoplasmic Loop of Bovine Rhodopsin2011

    • Author(s)
      Aya Nakatsuma
    • Journal Title

      Biophys J.

      Volume: 100 Pages: 1874-1882

    • DOI

      10.1016/j.bpj.2011.02.054

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Sensory rhodopsin-I as a bidirectional switch : opposite conformational changes from the same photoisomerization2011

    • Author(s)
      Jun Sasaki
    • Journal Title

      Biophys.J.

      Volume: 100 Pages: 2178-2183

    • DOI

      10.1016/j.bpj.2011.03.026

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Protein-bound water molecules in primate red- and green-sensitive visual pigments2011

    • Author(s)
      Kouta Katayama
    • Journal Title

      Biochemistry

      Volume: 51 Pages: 1126-1133

    • DOI

      10.1021/bi201676y

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Surface-enhanced ATR FTIR difference spectroscopy from a halorhodopsin monolayer on gold : dependence of spectral features on film properties2012

    • Author(s)
      Hao Guo
    • Organizer
      5th International Symposium on Nanomedicine (ISNM2011)
    • Place of Presentation
      名古屋大学(愛知県)
    • Year and Date
      20120315-20120317
  • [Presentation] Stepwise conformational changes upon anion pumping during the pharaonis halorhodopsin photocycle revealed by H/D unexchangeable amide-Avibrations2012

    • Author(s)
      Tetsunari Kimura
    • Organizer
      5th International Symposium on Nanomedicine (ISNM2011)
    • Place of Presentation
      名古屋大学(愛知県)
    • Year and Date
      20120315-20120317
  • [Presentation] 全反射赤外分光法によるMg^<2+>輸送体MgtEのイオン選択機構の解析2012

    • Author(s)
      木村哲就
    • Organizer
      2011年度日本生物物理学会中部支部講演会
    • Place of Presentation
      名古屋大学(愛知県)
    • Year and Date
      2012-03-19
  • [Presentation] Time-resolved infrared study on the light-driven chloride ion pump protein2012

    • Author(s)
      Yuji Furutani
    • Organizer
      4th Japan-Korea Seminar on Biomolecular Sciences : Experiments and Simulations
    • Place of Presentation
      東大寺総合文化センター(奈良県)(招待講演)
    • Year and Date
      2012-01-10
  • [Presentation] Ion-selective mechanism of Mg^<2+> transporter MgtE studied by attenuated total reflection FTIR spectroscopy2012

    • Author(s)
      Tetsunari Kimura
    • Organizer
      4th Japan-Korea Seminar on Biomolecular Sciences : Experiments and Simulations
    • Place of Presentation
      東大寺総合文化センター(奈良県)
    • Year and Date
      2012-01-10
  • [Presentation] SEIRA difference spectroscopy on a halorhodopsin monolayer tethered on gold surface2011

    • Author(s)
      Hao Guo
    • Organizer
      5th Asia and Oceania Conference on Photobiology
    • Place of Presentation
      奈良県新公会堂(奈良県)
    • Year and Date
      20110730-20110801
  • [Presentation] Spectroscopic Analysis of Specific Photochemical Reactions in an Isolated Nanospece Formed by a Well-Designed Organo-Metal Complex2011

    • Author(s)
      Yuji Furutani
    • Organizer
      The 5^<th> Symposium Molecular Science for Supra Functional Systems-Development of Advanced Methods for Exploring Elementary Processes-
    • Place of Presentation
      Royton Sapporo(北海道)
    • Year and Date
      20110711-20110713
  • [Presentation] 全反射赤外分光法によるMg^<2+>輸送体MgtEのイオン選択機構の解析2011

    • Author(s)
      木村哲就
    • Organizer
      第11回日本蛋白質科学会年会
    • Place of Presentation
      ホテル阪急エキスポパーク(大阪府)
    • Year and Date
      20110607-20110609
  • [Presentation] Surface-enhanced ATR-FTIR difference spectroscopy from a halorhodopsin monolayer on gold island films2011

    • Author(s)
      Hao Guo
    • Organizer
      The 49th Annual Meeting of the Biophysical Society of Japan
    • Place of Presentation
      兵庫県立大学(兵庫県)
    • Year and Date
      2011-09-18
  • [Presentation] Ion-selective mechanism of Mg^<2+> transporter MgtE studied by attenuated total reflection FTIR spectroscopy2011

    • Author(s)
      Tetsunari Kimura
    • Organizer
      The 49th Annual Meeting of the Biophysical Society of Japan
    • Place of Presentation
      兵庫県立大学(兵庫県)
    • Year and Date
      2011-09-18
  • [Presentation] Development of stopped-flow attenuated total reflection FTIR spectroscopy for detecting dynamic structural changes in ion transporters2011

    • Author(s)
      Yuji Furutani
    • Organizer
      The 49th Annual Meeting of the Biophysical Society of Japan
    • Place of Presentation
      兵庫県立大学(兵庫県)(招待講演)
    • Year and Date
      2011-09-17
  • [Presentation] Ion-protein interactions studied by ATR-FTIR spectroscopy2011

    • Author(s)
      Yuji Furutani
    • Organizer
      14th Asian Chemical Congress
    • Place of Presentation
      Queen Sirikit Convention Center (Bangkok, Thailand)(招待講演)
    • Year and Date
      2011-08-11

URL: 

Published: 2013-06-26  

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