甲状腺未分化癌におけるPodocalyxinとEMTの役割と治療応用に関する解析

2011 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 22790352
• Research Institution: Wakayama Medical University
• Principal Investigator: 児玉 理恵子 和歌山県立医科大学, 医学部, 学内助教 (20336887)
• Keywords: 癌 / 病理学

Research Abstract

甲状腺乳頭癌におけるPodocalyxin(PODXL)とEMTとの関連を検討する為、甲状腺乳頭癌由来培養細胞株K1,ONCO-DG1に、レトロウイルスベクターを用いてPODXL強制発現細胞を作成したところ、E-cadherin発現、vimentin発現に変動は無く、EMTとの関連は認められなかったが、種々の甲状腺腫瘍でPODXL発現を検討した結果では、甲状腺未分化癌のみでPODXL発現が認められることより、PODXLが甲状腺腫瘍の悪性度・悪性化に関連する可能性を考え、PODXL強制発現B-CPAP,ONCO-DG1細胞を用いて、増殖能の変化、細胞浸潤・移動能の変化を検討した。PODXLによる細胞増殖能の変動を検討するため、MTS assayを行ったところ、PODXL強制発現細胞での増殖能変化は認められなかった。細胞移動能の変化を検討するため、Fibronectinコートのチャンバースライドを用いて、fetal bovine serumをchemoattractantとして、migration assay(Fibronectin)を行った。PODXL強制発現B-CPAP、ならびにONCO-DG1細胞では、細胞移動能の亢進が認められた。細胞移動能亢進が認められた事より、ファロイジン染色を行い、filopodia細胞数の変化を検討したところ、PODXL強制発現B-CPAP、ならびにONCO-DG1細胞ではfilopodia細胞数は4倍程度、増加することが示された。Filopodiaの更新が認められた事より、Ezrinのリン酸化につき検討した結果、PODXL強制発現B-CPAP、ならびにONCO-DG1細胞ではEzrinの567スレオニン残基でのリン酸化更新が認められた。