代謝性疾患病態形成におけるTwist1の機能解析と会合分子群の網羅的解析

2010 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 22790845
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 藤本 昌紀 千葉大学, 医学部附属病院, 助教 (20451742)
• Keywords: Twist1 / 動脈硬化 / 転写因子 / クロマチン会合分子

Research Abstract

Twist1の会合分子群を網羅的に同定するため、HA-tag、Flag-tag融合型Twist1アデノウイルスを作成している。これらのアデノウイルスを白色脂肪細胞株に感染させ、抗HA抗体、Flag抗体で免疫沈降し、SDS-PAGE、銀染色後、マススペクトロメトリーで会合分子群を同定するための、基礎検討を行っている。今後、実際の検討を行っていく。また、Twist1の発現により、遺伝子発現のプロファイルがどのように変化するかを検討した。マクロファージと脂肪組織においてTwist1が高発現している、ap2-Twist1-Transgenic (Tg)マウスおよび野生型マウスより、骨髄由来マクロファージを採取、RNAを抽出し、マイクロアレイにより検討を行った。結果として炎症や泡沫化に関わる幾つかの遺伝子群が、変化していることが判明した。そして、Twist1の動脈硬化巣における役割についての検討を行った。動脈硬化巣においては、マクロファージの炎症と泡沫化が重要な役割を果たすことが知られる。代表的な粥状動脈硬化モデルである高脂肪食負荷ApoE KOマウスで、免疫染色法にて評価したところ、動脈硬化巣の内膜下に浸潤しているマクロファージにおいて、Twist1が発現していた。また、動脈硬化巣で発現が上昇する炎症性サイトカインTNF-αでマクロファージを刺激すると、Twist1の発現が上昇することがわかった。一方、Twist1を強制発現したマクロファージでは、泡沫化は変化を認めなかったが、炎症は抑制されていた。現在、in vivoにおける役割を検討するため、Tgおよび野生型マウス由来の骨髄を、ApoE KOマウスに移植し、その後高脂肪食を負荷し、動脈硬化を惹起する実験系を立ちあげ、解析中である。

Research Products

• [Journal Article] The roles of transforming growth factor-β and Smad3 signaling in adipocyte
  • Author(s): Tsurutani Y, Fujimoto M, Takemoto M, Irisuna H, Koshizaka differentiation and obesity M, Onishi S, Ishikawa T, Mezawa M, He P, Honjo S, Maezawa Y, Saito Y, Yokote K.
  • Journal Title: Biochemical and Biophysical Research Communications Volume: (印刷中)
  • Peer Reviewed