2011 Fiscal Year Annual Research Report
細菌ストレス応答におけるキノロン耐性化因子の役割に関する研究
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22790958
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| Research Institution | Toho University |
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Principal Investigator |
嵯峨 知生 東邦大学, 医学部, 助教 (80459809)
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| Keywords | 感染症治療学 / 抗菌化学療法 / 薬剤耐性 / 細菌ストレス応答 / キノロン系抗菌薬 / qnr |
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| Research Abstract |
病原微生物の薬剤耐性は臨床上問題である。研究代表者らがこれまで研究してきたキノロン系抗菌薬耐性化因子qurBは、大腸菌においてSOS応答というストレス応答制御下にあることが報告された。しかしストレス応答因子としてのQnrBの役割は十分説明されていない。菌側の重要な生存戦略であるストレス応答はSOS応答以外も多種存在し役割や誘因も多様であるが、遺伝子水平伝播の促進を通じて細菌の薬剤耐性化や病原因子獲得に関与する例も知られる。研究表者らは、QnrBの細菌における薬剤耐性、およびそれ以外における役割を解明することを通じて、病原微生物の薬剤耐性および病原性制御につながる基礎的知見を得ることを目的として本研究を行ってきた。
ストレス応答を遺伝子転写量等で比較評価する系はすでに有しているが、qurBの役割を決定的に明らかにするためにはisogenicな菌株同士で比較することが必須である。このため本年度はqurBノックアウト菌株の作成を本年度は集中的に行った。
C.braakii ATCC51113^Tが染色体上に保有するqurB様遺伝子に対し、大腸菌で提案されているLambda-Redrecombinaseを利用した系(PNAS97:6640)をqurBのノックアウト菌株の作成を試みた。C.braakiiへの同法の応用は報告がないため、各工程での条件検討が必要であった。同菌株は染色体上にコードされるクラスCβラクタマーゼを産生するため、大腸菌で使用される選択薬剤アンピシリンを使用することができないことが障壁であったが、薬剤種類と濃度を変更することでヘルパープラスミドpKD46を導入した菌株の選択に成功している。他、使用する薬剤濃度、挿入するDNA調整法、選択条件等を検討してノックアウト株を得るための条件は至適化されつつある。
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