嚢胞化絨毛特異的分子マーカーの同定と絨毛性疾患への臨床応用に関する研究

2011 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 22791535
• Research Institution: Nagasaki University
• Principal Investigator: 三浦 生子 長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 客員研究員 (00404301)
• Keywords: 嚢胞化絨毛 / 分子マーカー / RNA / microRNA / マイクロアレイ

Research Abstract

1)絨毛特異的cell-free miRNA定量化の絨毛性疾患における臨床的有用性を明らかにする
目的:全胞状奇胎特異的microRNAを網羅的にスクリーニングし、その臨床的有用性について検討した。
方法:(1)全胞状奇胎組織とその患者血液、および正常妊娠例より採取した胎盤組織からmicroRNAを抽出し、次世代高速シーケンス法により各検体間の発現レベルを比較した。血液細胞に発現がなく、かつ正常胎盤組織と比較して奇胎組織で2倍以上発現しているmicroRNAを抽出した。(2)全胞状奇胎組織14例、初期の正常絨毛組織20例を対象として、(1)で抽出されたmicroRNAの発現量をReal-time RT-PCR法を用いて定量し、全胞状奇胎組織に高発現するmicroRNAを選別した。(3)全胞状奇胎15例、正常初期妊娠15例の血漿を対象として、(2)で選別されたmicroRNAの血漿中に流入量を比較し、全胞状奇胎に高発現するmicroRNAを特定した。(4)全胞状奇胎15例の血漿を対象として(3)で特定したmicroRNAが掻爬術前後でどう推移するかを検証した。統計学的有意差はp<0.05とした。本研究は倫理委員会の承認を得て、同意の下に行われた。
成績:(1)次世代高速シーケンス法を用いた網羅的解析により、全胞状奇胎特異的microRNAの候補として12種類のmicroRNAが抽出された。そのすべてが19番染色体上のクラスター(C19MC)領域に存在していた。(2)全胞状奇胎組織特異的microRNAとしてhsa-miR-520f、hsa-miR-520b、hsa-miR-520c-3p、hsa-miR-519b-3pの4つが選別された。(3)全胞状奇胎患者血漿中の特異的microRNAとしてhsa-miR-520fが特定された。(4)全胞状奇胎患者血漿15例すべてにおいて掻爬術前後でhsa-miR-520f流入量は有意に減少していた(willcoxon test, p<0.05)。
結論:全胞状奇胎特異的microRNAが存在し、それらはC19MC領域に存在していた。特にhsa-miR-520fは全胞状奇胎の分子腫瘍マーカーになりうると示唆された。
2)絨毛特異的mRNA/miRNAの染色体局在領域に遺伝子異常の有無を検索することで、本疾患発症の分子メカニズム解明の手掛かりを得る。
胞状奇胎と患者及び夫の血液DNAを一組として、計15組についてDNA多型マーカーを用いた検体間の比較解析を行ったが、全ての組で染色体の微細欠失の存在は認められなかった。

Research Products

• [Journal Article] Epidemiology of human papillomavirus genotypes in pregnant Japanese women (2011)
  • Author(s): Yamasaki K, Miura K, Shimada T, Miura S, Abe S, Murakami M, Sameshima T, Fujishita A, Kotera K, Kinoshita A, Yoshiura K, and Masuzaki H.
  • Journal Title: Journal of Human Genetics Volume: 56 Pages: 313-315
• [Journal Article] Clinical application of fetal sex determination using cell-free fetal DNA in pregnant carrers of X-linked genetic disorders (2011)
  • Author(s): Miura K, Higashijima A, Shimada T, Miura S, Yamasaki K, Abe S, Jo O, Kinoshita A, Yoshida A, Yoshimura S, Niikawa N, Yoshiura K, Masuzaki H
  • Journal Title: Journal of Human Genetics Volume: 56 Pages: 296-299
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Pre-vaccination epidemiology of human papillomavirus infections in Japanese women with a bnormal cytology (2011)
  • Author(s): Yamasaki K, Miura K, Shimada T, Ikemoto R, Miura S, Murakami M, Sameshima T, Fujishita A, Kotera K, Kinoshita A, Yoshiura K, Masuzaki H
  • Journal Title: Journal of Obstetrics and Gynaecology Research Volume: 37 Pages: 1666-1670
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 全胞状奇胎特異的microRNAの網羅的解析 (2011)
  • Author(s): 三浦清徳、長谷川ゆり、東島愛、城大空、阿部修平、三浦生子、山崎健太郎、吉田敦、吉村秀一郎、吉浦孝一郎、増崎英明
  • Organizer: 第63回日本産科婦人科学会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場(大阪)
  • Year and Date: 20110829-20110831
• [Presentation] 全胞状奇胎において強発現するmicroRNAの同定 (2011)
  • Author(s): 長谷川ゆり、三浦清徳、東島愛、城大空、三浦生子、山崎健太郎、吉田敦、吉村秀一郎、古谷健一、増崎英明
  • Organizer: 第47回日本周産期・新生児医学会
  • Place of Presentation: 札幌コンベンションセンター(北海道)
  • Year and Date: 20110710-20110712
• [Presentation] 正常妊娠と胞状奇胎の双胎妊娠後に認められた胎盤部トロホブラスト腫瘍の一例 (2011)
  • Author(s): 東島愛、吉田敦、城大空、阿部修平、谷川輝美、三浦生子、山崎健太郎、吉村秀一郎、増崎英明
  • Organizer: 第29回日本絨毛性疾患研究会
  • Place of Presentation: 東京ステーションコンファレンス(東京)
  • Year and Date: 2011-09-30