2010 Fiscal Year Annual Research Report
プロテオミクスによるヒト子宮内膜機能を担うシグナル分子群の探索
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22791547
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
西川 明花 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (60445236)
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| Keywords | 子宮内膜 / シグナル伝達 / 脱落膜化 / 着床 / キナーゼ |
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| Research Abstract |
本年度は、チロシンキナーゼSRCの種々の変異体を発現するアデノウイルスベクターの構築を行った。特に、構成的に活性化している活性化型SRC(dominant active SRC;DA-SRC)を発現するウイルスベクターの構築を主に行った。当初は、DA-SRCのcDNAをpShuttleベクターに挿入した後に、それを含む全発現カセットをI-Ceu IとPI・Sce Iの制限酵素で切り出し、予め両制限酵素で処理されているAdeno-X viral DNAに挿入する戦略を採用した。条件を適宜変えながら様々な方法でウイルス構築を試みたが、目的のアデノウイルスは得られなかった。そこで、新しいversionであるpShuttle2ベクターに変更して最初からやり直したが、DA-SRCアデノウイルスは得られなかった。この結果をふまえて、DA-SRCレンチウイルスの作成、あるいは第三者からのDA-SRCアデノウイルスの供与に戦略を変更した。一方、脱落膜化に伴って発現が上昇するプロラクチンおよびインスリン様成長因子結合蛋白1型(IGFBP-1)については、それぞれの発現プロモーターを有するルシフェラーゼレポータープラスミドを用意し得た。プロラクチンについては第三者から供与を受ける一方、後者については、ヒトゲノムから目的のIGFBP-1プロモーター領域をPCRクローニングしてPGL3レポーターベクターに挿入した。以上、本年度は、次年度の研究につながる種々のマテリアルの準備を行った。
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[Presentation] Possible involvement of endometrial stem/progenitor cells in the pathogenesis of endocetriosis.2010
Author(s)
Tetsuo Maruyama, Hirotaka Masuda, Takashi Nagashima, Takashi Kajitani, Masanori Ono, Sayaka Nishikawa-Uchida, Hideyuki Oda, Kaoru Miyazaki, Toru Arase, Maki Kagami, Hiroshi Uchida, Hironori Asada, Yasunori Yoshimura
Organizer
The First Asian Conference on Endometriosis(ACE)
Place of Presentation
Shanghai, China(招請講演)
Year and Date
20101016-20101017
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[Presentation] Prospective isolation and functional analysis of stem/progenitor cells from the human uterine myometrium.2010
Author(s)
Masanori Ono, Tetsuo Maruyama, Takashi Kajitani, Hiroshi Uchida, Hideyki Oda, Sayaka Nishikawa-Uchida, Kaoru Miyazaki, Takashi Nagashima, Hirotaka Masuda, Hideyuki Okano, Yumi Matsuzaki, Yasunori Yoshimura
Organizer
8th International Society for Stem Cell Research(ISSCR)
Place of Presentation
San Francisco, CA USA
Year and Date
20100616-20100619
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[Presentation] Cell surface marker-based isolation and function and functional analysis of human myometrial stem cells.2010
Author(s)
Masanori Ono, Tetsuo Maruyama, Hiroshi Uchida, Hideyuki Oda, Sayaka Nishikawa, Maki Kagami, Toru Arase, Takashi Nagashima, Hirotaka Masuda, Hironori Asada, Daisuke Aoki, Yasunori Yoshimura
Organizer
第62回日本産科婦人科学会International Session
Place of Presentation
東京
Year and Date
20100423-20100425
