プロテオミクスによるヒト子宮内膜機能を担うシグナル分子群の探索

2011 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 22791547
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 西川 明花 慶應義塾大学, 医学部, 助教 (60445236)
• Keywords: 子宮内膜 / シグナル伝達 / 脱落膜化 / 着床 / キナーゼ / 上皮間葉転換

Research Abstract

本研究では、子宮内膜の増殖・分化に伴って特異的に活性化されるチロシンキナーゼSRCが関与する細胞内シグナル伝達経路を、分子レベルで解明し、着床ならびに妊娠成立・維持における役割を明らかにすることを目的とする。分化誘導させた初代内膜培養細胞より抽出した蛋白を用いて、チロシンリン酸化抗体を用いた2次元電気泳動法によるウエスタンブロットと、それと並行して行った泳動ゲル銀染色の結果を比較検討したところ、いくつかの新たなリン酸化スポットが分化誘導した内膜細胞に認められた。しかしながら、恐らく個体差によると思われるバラツキが検体間に認められるため、安定した結果を得るためには細胞株の使用が望ましいと判断し、不死化内膜間質細胞株の樹立作業のプロセスに参画した。その結果、樹立した不死化内膜細胞株は、初代内膜培養細胞と同様に性ステロイドホルモンに反応して分化することが明らかとなった。また、より生体内に近い細胞内シグナル伝達経路を明らかにするためには、単一の細胞だけを用いるのではなく、腺上皮細胞と間質細胞を含んだ内膜様組織での検討が必要なため、内膜再構成システムでの検討に着手した。その一環として、腺上皮細胞は性ステロイドだけでなく着床胚のシグナルを受けて分化誘導と機能獲得が促進されるので、in vitro着床モデルを用いて、腺上皮細胞の着床期周辺の振る舞い検討したところ、N-カドヘリンを中心に上皮間葉転換(epithelial mesenchymal transition, EMT)が生じていることが判明し、細胞骨格の調節分子でもあるSRCとの相互作用を調べるうえで、重要な知見が得られた。

Research Products

• [Journal Article] Studies using an in vitro model show evidence of involvement of epithelial-mesenchymal transition of human endometrial epithelial cells in human embryo implantation (2012)
  • Author(s): Uchida H, Maruyama T, Nishikawa-Uchida S, Oda H, Miyazaki K, Yamasaki A, Yoshimura Y
  • Journal Title: J Biol Chem Volume: 287(7) Pages: 4441-4450
  • Peer Reviewed
• [Presentation] Possible evidence for epithelial-mesenchymal transition mediating displacement of endometrial cells away from the site of embryo implantation (2011)
  • Author(s): Hiroshi Uchida, Tetsuo Maruyama, Sayaka Uchida-Nishikawa, Yasunori Yoshimura
  • Organizer: 2nd World Congress on Reproductive Biology (WCRB)
  • Place of Presentation: Cairns, Australia
  • Year and Date: 20111009-20111012
• [Presentation] Contribution of myometrial stem/progentior cells to pregnancy-induced uterine remodeling (2011)
  • Author(s): Masanori Ono, Tetsuo Maruyama Takashi Kajitani, Hiroshi Uchida Hideyuki Oda, Sayaka Uchida, Toru Arase, Akiko Yamasaki, Takashi Nagashima, Hirotaka Masuda, Yasunori Yoshimura
  • Organizer: 2nd World Congress on Reproductive Biology(WCRB)
  • Place of Presentation: Cairns, Australia
  • Year and Date: 20111009-12
• [Presentation] Identification of a novel endometrial gene associated with menstruation, endometriosis and adenomyosis (2011)
  • Author(s): Tetsuo Maruyama, Takashi Kajitani, Hideyuki Oda, Kaoru Miyazaki, Sayaka Uchida, Akiko Yamasaki, Hironori Asada, Hiroshi Uchida, Yasunori Yoshimura
  • Organizer: 11th World Congress on Endometriosis (WCE)
  • Place of Presentation: Montpellier, France
  • Year and Date: 20110904-20110907
• [Presentation] Possible involvement of UDP-glucose and its recepter P2RY14 in embryo implantation (2011)
  • Author(s): Toru Arase, Tetsuo Marayama, Hiroshi Uchida, Kaoru Miyazaki, Hideyuki Oda, Sayaka Uchida-Nishikawa, Maki Kagami, Akiko Yamasaki, Kayoko Tamaki, Yasunori Yoshimura
  • Organizer: 27th European Society of Human Reproduction & Embryology (ESHRE)
  • Place of Presentation: Stockholm, Sweden
  • Year and Date: 20110703-20110706
• [Presentation] CD93 and CD31 as possible candidate markers for human endometrial stem/progenitor cells (2011)
  • Author(s): Kaoru Miyazaki, Takashi Kajitani, Hirotaka Masuda, Toshio Hamatani, Hideyuki Oda, Akiko Yamasaki, Sayaka Nishikawa-Uchida, Hiroshi Uchida, Yasunori Yoshimura, Tetsuo Maruyama
  • Organizer: 9th International Society for Stem Cell Research (ISSCR)
  • Place of Presentation: Tronto, Ontario Canada
  • Year and Date: 20110615-20110618