神経芽腫の発がんにおけるMYCNアンチセンス遺伝子(NCYM)の機能解析

2010 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 22890241
• Research Institution: Chiba Cancer Center (Research Institute)
• Principal Investigator: 末永 雄介 千葉県がんセンター(研究所), 研究局・がん治療開発グループ, 研究員 (80581793)
• Keywords: NCYM / MYCN / 神経芽腫 / Natural Antisense RNA / 遺伝子増幅 / P53ファミリー遺伝子 / P63 / 転写制御

Research Abstract

がん遺伝子MYCNは神経芽腫で高頻度に遺伝子増幅し、悪性化に中心的な役割を果たすことが明らかになっている。1990年、MYCN遺伝子領域のアンチセンスDNA鎖からmRNAが転写されることが示され、このアンチセンス転写産物はNCYMと命名された。NCYMはMYCNとともに神経芽腫予後不良群において増幅し、過剰発現することが示されていたが、その生理的機能は明らかではなかった。神経芽腫106検体におけるNCYM mRNA発現量をリアルタイムPCR法により定量したところ、NCYM mRNA発現量はMYCN mRNA発現量と有意に相関し、予後不良群において高発現した。内在性NCYMタンパク質を同定するため、抗体を作製し、神経芽腫細胞株における発現量をウエスタンブロッティング法により検討したところ、核内タンパク質として検出され、NCYMタンパク質はMYCNの増幅した細胞において高発現した。また、クロマチン免疫沈降法による解析の結果、NCYMタンパク質がMYCNのプロモーター領域に結合し、ヒストンのアセチル化を昂進することで、MYCNの転写活性化に寄与することを見出した。ヒト神経芽腫細胞CHP134にレチノイン酸を処理すると細胞死が誘導されるが、このときMYCNおよびNCYM発現量は低下した。さらに、CHP134細胞におけるNCYMノックダウンによりMYCNの発現低下およびアポトーシスが誘導された。以上の結果から、NCYMは転写因子としてMYCNを誘導することで、神経芽腫の悪性化に寄与する可能性が示唆された。

Research Products

• [Journal Article] RUNX3 modulates DNA damage-mediated phosphorylation of tumor suppressor p53 at Ser-15 and acts as a Co-activator for p53 (2010)
  • Author(s): Yamada C., Ozaki T., Ando K., Suenaga Y., Inoue K., Ito Y., Okoshi R., Kageyama H., Kimura H., Miyazaki M., Nakagawara A.
  • Journal Title: J.Biol.Chem. Volume: 285 Pages: 16693-16703
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] NFBD1/MDC1 participates in the regulation of G2/M transition in mammalian cells. (2010)
  • Author(s): Bu Y., Suenaga Y., Okoshi R., Sang M., Kubo N., Song F., Nakagawara A., Ozaki T.
  • Journal Title: Biochem.Biophys.Res.Commun. Volume: 397 Pages: 157-162
  • Peer Reviewed
• [Presentation] MYCNの相補鎖遺伝子産物NCYMは神経芽腫においてリプログラミングファクターの発現を誘導する (2010)
  • Author(s): 金子伊樹、末永雄介、松本大介、中村洋子、大平美紀、中川原章
  • Organizer: 第26回日本小児がん学会学術総会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場(大阪市)
  • Year and Date: 2010-12-18
• [Presentation] MYCNアンチセンス遺伝子NCYMは神経芽腫予後不良群で高発現し、MYCNの発現を誘導する (2010)
  • Author(s): 末永雄介、金子伊樹、松本大介、中村洋子、大平美紀、中川原章
  • Organizer: 第26回日本小児がん学会学術総会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場(大阪市)
  • Year and Date: 2010-12-17
• [Presentation] NCYM, an antisense transcript of MYCN, induces expression of reprogramming factors in human neuroblastoma (2010)
  • Author(s): Yoshiki Kaneko, Yusuke Suenaga, Daisuke Matsumoto, Yohko Nakamura, Miki Ohira, Akira Nakagawara
  • Organizer: 第33回日本分子生物学会年会, 第83回日本生化学会大会合同大会
  • Place of Presentation: 神戸ポートアイランド(神戸市)
  • Year and Date: 2010-12-09
• [Presentation] NCYM induces Oct3/4 expression in neuroblastoma (2010)
  • Author(s): Yoshiki kaneko, Yusuke Suenaga, Daisuke Matsumoto, Yohko Nakamura, Miki Ohira, Akira Nakagawara
  • Organizer: 第69日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場(大阪市)
  • Year and Date: 2010-09-23
• [Presentation] Natural MYCN antisense gene, NCYM, functions asan oncogene in neuroblastoma through induction of MYCN (2010)
  • Author(s): Yusuke Suenaga, Yoshiki Kaneko, Daisuke Matsumoto, Yohko Nakamura, Miki Ohira, Seiki Haraguchi, Akira Nakagawara
  • Organizer: 第69日本癌学会学術総会
  • Place of Presentation: 大阪国際会議場(大阪市)
  • Year and Date: 2010-09-23
• [Presentation] NCYM, a protein product of an natural antisense MYCN gene co-amplified with MYCN, targets MYCN for functional modulation and affects the prognosis of neuroblastoma (2010)
  • Author(s): Yusuke Suenaga, Yoshiki Kaneko, Daisuke Matsumoto, Yohko Nakamura, Miki Ohira, Toshinori Ozaki, Akira Nakagawara
  • Organizer: Advances in Neuroblastoma Research 2010
  • Place of Presentation: The Stockholm City Conference Centre(Stockholm)
  • Year and Date: 2010-06-22
• [Presentation] NCYM induces Oct3/4 expression in neuroblastoma (2010)
  • Author(s): Yoshiki Kaneko, Yusuke Suenaga, Daisuke Matsumoto, Yohko Nakamura, Miki Ohira, Akira Nakagawara
  • Organizer: 日本分子生物学会第10回春季シンポジウム
  • Place of Presentation: ホテル松島大観荘(宮城郡)
  • Year and Date: 2010-06-07
• [Presentation] Transcriptional repression of MYCN is mediated byTAp63 in human neuroblastomas. (2010)
  • Author(s): Yusuke Suenaga, Yoshiki Kaneko, Mami Yamamoto, Daisuke Matsumoto, Tomoe Ichikawa, Toshiyuki Moritan, Takehiko Kamijo, Yohko Nakamura, Miki Ohira, Toshinori Ozaki, Akira Nakagawara
  • Organizer: American Association for Cancer Research 101st ANNUAL MEETING
  • Place of Presentation: Walter E.Washington Convention Center(Washington,DC)
  • Year and Date: 2010-04-21