2023 Fiscal Year Research-status Report
Development of long noncoding RNA-targeting therapies for canine tumors
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22K06013
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| Research Institution | Nippon Veterinary and Life Science University |
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Principal Investigator |
吉村 久志 日本獣医生命科学大学, 獣医学部, 准教授 (70645241)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2026-03-31
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| Keywords | 長鎖ノンコーディングRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Metastasis-associated lung cancer transcript 1（MALAT1）は、ヒトの多くのがんの発生と発症に関与し、バイオマーカーや治療標的として機能していると報告されている長鎖ノンコーディングRNAである。一方でMALAT1が、がんの進行を抑制するとされる相反する報告も認められる。昨年度までの研究では、リアルタイムRT-PCRによってイヌの乳腺癌細胞株のいずれにおいてもMLAT1が非常に多く発現しているのを確認したが、その後の解析でイヌのMALAT1として登録されている塩基配列がMALAT1 Antisense RNA（TALAM1）であることが判明し、リアルタイムRT-PCRに用いたプローブはTALAM1とMALAT1の両方を検出する可能性が示された。TALAM1はがん形成の過程でMALAT1を制御しているともされる長鎖ノンコーディングRNAである。そこで、イヌのMALAT1とTALAM1にそれぞれ特異的なプローブを作製し、それらの組織上での局在をin situ hybridizationによって検討した。複数のイヌの正常乳腺および乳腺腫瘍において、MALAT1は様々な細胞種に発現が認められた。一方で、TALAM1については未だ染色条件の検討を行っている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
イヌのMALAT1とTALAM1の発現レベルを別々に検出できるリアルタイムPT-PCRのプライマーの作製を試みたが難しいことが判明したため、in situ hybridizationのプローブを作製した。作製したプローブによりin situ hybridizationを行ったところ、MALAT1については容易に染色条件が設定できたが、TALAM1については未だ染色条件が設定できず研究の進捗が遅れている。
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| Strategy for Future Research Activity |
イヌのTALAM1のin situ hybridizationについて、引き続き作製したプローブの染色条件の検討を行うが、別の配列のプローブも新たに設計して試す予定である。またMALAT1とTALAM1以外のイヌの長鎖ノンコーディングRNAについても検討を実施する予定である。
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| Causes of Carryover |
一部の標的のin situ hybridizationの染色条件の検討の遅れから次年度使用額が生じたが、次年度に実施する同実験において使用する予定である。
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