2022 Fiscal Year Research-status Report
スプライシングバリアントの探索を基盤とした、NURPとNMUの生理的役割の解明
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22K06045
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| Research Institution | University of Miyazaki |
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Principal Investigator |
丸山 圭介 宮崎大学, 農学部, 准教授 (20612386)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | 新規ペプチドホルモン / ニューロメジンU関連ペプチド / ニューロメジンU |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本年度は、雌ラットの生殖内分泌機構におけるNURP/NMU前駆体ペプチドの役割を探ることとした。まず、発情後期の雌ラットの側脳室へNURPを投与して、その後の血中プロラクチン（PRL）濃度の変化を調べた。その結果、NURP投与によって、PRL分泌の著しい上昇が観察された。この結果は、これまでの研究結果と同様であり、再現性が確認されたといえる。次に、雄ラットに同様の投与実験を行い、先の雌ラットの結果と比較した。その結果、雌ラットにおけるPRL分泌促進作用は雄よりも強いことが判明した。
そこで、雌雄におけるNURPの作用強度の違いに、内因性エストロゲンが関係しているのか否かを検証するため、卵巣摘出処置（OVX）を施したラットにNURPを側脳室投与し、その後の血中PRL濃度の変化を調べた。ところが、OVXラットにおいては、NURPによるPRL分泌促進は認められなかった。
次の実験では、性周期や妊娠といった血中プロラクチン（PRL）濃度が変化するような生殖内分泌的イベントが起こった際に、内因的なNURP/NMUが本当に発現変化しているのか、リアルタイムPCR法により調べた。本実験には、二峰性のPRLサージが観察される偽妊娠ラットを用いた。本実験もこれまでに予備的な検討を進めていたものであり、今回、より詳細に調べるとともに実験の再現性を確認することとした。その結果、血中PRL濃度が上昇し始めた午前3：00になるとNURP/NMU mRNAの発現が有意に低下し、血中PRL濃度のピークとなる午前6：00まで、通常の半分程度の発現量になっていた。その後、血中PRL濃度がベース値に戻った午前9：00には、NURP/NMU mRNA 発現も元に戻った。この結果はこれまでの検討と同様であり、NURP/NMU mRNA 発現の低下が血中PRL濃度の減少を誘起している可能性があることが示された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
概要の項目において述べた通り、本年度、雌ラットにおいてNURPがPRL分泌を強力に促進すること、NURPの作用強度には雌雄ラットにおいて違いがあること、OVXラットにおいてNURPが作用しないことを明らかにした。一方で、偽妊娠ラットの生理的なPRL濃度の上昇が観察される時間帯、NMU/NURP mRNAの発現は減少していることが明らかとなった。これは、偽妊娠ラットにおけるPRL分泌は、NURPによるものでは無く、むしろNMUの発現低下が原因である可能性を示している。これらの結果は、「NURPとNMUがどのように分泌され、どのような生理的役割を担っているのか？」という疑問を解決するうえで、重要な情報となる。
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| Strategy for Future Research Activity |
雌ラットの生殖内分泌機構におけるNURP/NMU前駆体ペプチドの役割の解明を継続する。特に、ラットの性周期におけるNURP/NMU前駆体ペプチドの発現変動、作用強度の変化を調べる。また、NURP、NMU発現ニューロンの形態学的解析も実施する。両ペプチドホルモンに対する特異的抗体を用いて、NURP発現ニューロン、NMU発現ニューロンをそれぞれ免疫組織化学的手法により、可視化する予定である。
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| Causes of Carryover |
本年度は雌ラットのPRL分泌におけるNURP投与の影響の解明、偽妊娠ラットのPRL分泌におけるNMU/NURP mRNAの発現解析を中心に実施し、NURP、NMU発現ニューロンの形態学的な解析は次年度に実施することとしたため、この分の予算を残した。次年度に繰り越した分は、形態学的解析に必要な消耗品類の購入に使用する。
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