2023 Fiscal Year Research-status Report
ロコモ改善を志向した骨代謝を制御する天然機能分子の探索
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22K06670
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| Research Institution | Nihon University |
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Principal Investigator |
矢作 忠弘 日本大学, 薬学部, 助教 (40632766)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小川 拓哉 国際医療福祉大学, 薬学部, 准教授 (30457147)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | 骨粗しょう症 / ロコモティブシンドローム / 骨形成 / 骨芽細胞 / 骨格筋細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
天然資源からロコモ改善を志向した骨代謝を制御する天然機能分子を探索するために、R5年度はスクリーニングエキスの作成とサルコペニアを評価するためのスクリーニング系の確立を行った。
1) R4年度に植物環境調査を行った沖縄県石垣島の植物について、部位毎にわけたのちに70%エタノールで抽出しエキスを作製した。植物数は302種類で、最終的なエキスの数は503種類となった。
2) 骨形成に関与するシグナル伝達であるBMP/Smad活性をレポーターアッセイにより評価した際に、活性エキスとしてヒットしたオオモクゲンジの果実について成分探索を行い、methyl gallate、kaempferol、kaempferinおよびkaempferolやquercetin配糖体の没食子酸エステルなどの9種の化合物を単離した。これから活性評価を行う予定である。
3) 筋萎縮に関わる遺伝子であるMuRF-1をターゲットとしたレポーターアッセイの構築を行った。HEK293細胞にMuRF-1の転写認識配列を持つプラスミドをトランスフェクションし、その後デキサメタンゾンで刺激するとともにサンプルを添加し、24時間後のルシフェラーゼ活性を評価した。ところが、抑制物質として報告のあるイソフラボンを加えた際、逆に活性化を促してしまったことから、HEK293細胞ではうまく評価できない可能性が示唆された。そこで骨格筋細胞であるC2C12にトランスフェクションを行うために、細胞数やトランスフェクション時間などを検討した。この確立した評価系を用いて、スクリーニングを行った結果、ラッカセイ殻の抽出物に抑制活性が認められた。今後活性本体の探索を行う予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
4: Progress in research has been delayed.
Reason
スクリーニング系の確立が難航してしまったため、活性評価が遅れてしまっている。しかし、その間にスクリーニング対象のエキス数を増やすことはできたため、次年度に早急に対応する。これらのことから「遅れている」と評価した。
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| Strategy for Future Research Activity |
今年度確立したMuRF-1を対象としたスクリーニング系を用いて、これまで作製してきたエキスのスクリーニングを行い、活性の認められた植物については、迅速に活性本体の探索を行いたい。また、活性の認められたラッカセイ殻については、単離化合物の活性評価と骨格筋細胞への影響を検討する。
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| Causes of Carryover |
骨格筋細胞関連のスクリーニングが遅れているため未使用額が生じている。そのため、その試薬代として用いる予定である。
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[Presentation] Higenamine 含有生薬の LC-TOF/MS による品質評価 (2)2024
Author(s)
矢作 忠弘, 渥美 聡孝, 渡邊 隼也, 三輪 健太, 髙橋 愛莉, 髙宮 知子, 楊 志剛, 三宅 克典, 坪田 勝次, 野崎 香樹, 松﨑 桂一
Organizer
日本薬学会第144年会 (横浜)
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