2022 Fiscal Year Research-status Report
Enzymological studies on N-acyl-PS a novel triacyl-type phospholipid
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22K06885
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| Research Institution | Kagawa University |
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Principal Investigator |
上田 夏生 香川大学, 医学部, 教授 (20193807)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
宇山 徹 香川大学, 医学部, 准教授 (30457337)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | N-アシルセリン / 酵素 / 脂質メディエーター / ホスファチジルセリン / リン脂質 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
３本の脂肪酸鎖を有するグリセロリン脂質である「トリアシル型リン脂質」は、ヒトを含む種々の動物組織から単離されている。代表的な分子であるN-アシル-PEは、ホスファチジルエタノールアミン（PE）のエタノールアミン部分のアミノ基に３本目の脂肪酸鎖が結合しており、脂質メディエーターであるN-アシルエタノールアミンの前駆体である。一方、PEがホスファチジルセリン（PS）に置き換わったN-アシル-PSは、脳などから単離されているが、生合成・分解経路はほとんど不明である。N-アシル-PSからの生成が想定されるN-アシルセリンは血管拡張・抗炎症・神経保護・骨形成などの生物活性を示す。本研究では、N-アシル-PSの代謝経路を特定し、関与する酵素の実体を解明することを目的とした。
１年目の令和４年度は、N-アシル-PSの生合成経路の手掛かりを得るための研究を実施した。N-アシル-PE合成活性（N-アシル転移活性）を有する既知の酵素のいずれかがN-アシル-PS合成能を併せ持つ可能性を考え、N-アシル転移活性を有する細胞質型ホスホリパーゼA2-ε（cPLA2ε）とPLAATファミリータンパク質（PLAAT-2）のcDNAを調製し、それぞれを哺乳類細胞で過剰発現させた。これらの細胞を[14C]エタノールアミンまたは[14C]セリンの存在下で培養した後に脂質を抽出し、薄層クロマトグラフィーで分離して放射能の分布を測定した。その結果、いずれの細胞においても[14C]エタノールアミンの標識により[14C]N-アシル-PEの生成を認めたのに対し、[14C]セリンによる[14C]N-アシル-PSに相当するバンドの生成は認められなかった。また、cPLA2εとPLAAT-2を発現させた細胞のホモジネートを[14C]ホスファチジルコリン と非標識PSと反応させたが、 [14C]N-アシル-PSは検出されなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
N-アシル-PE合成活性（N-アシル転移活性）を有する既知の酵素のいずれかがN-アシル-PS合成能を併せ持つ可能性を考えて実験を行なったが、いずれの酵素においてもN-アシル-PS合成活性を検出できなかったため。
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| Strategy for Future Research Activity |
当初の計画に従って研究を実施する予定である。cPLA2εやPLAAT-2を用いたN-アシル-PS合成活性の測定条件が至適でなかった可能性があるので、条件検討を進める。また、N-アシル-PSは脳に存在しているので、マウス脳を酵素源としてN-アシル-PS合成活性の測定条件を確立する。
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Research Products
(16 results)
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[Presentation] PLAAT1 deficiency alleviates high fat diet-induced hepatic lipid accumulation in mice2022
Author(s)
S.M. Khaledur Rahman, Toru Uyama, Zahir Hussain, Mohammad Mamun Sikder, Hiroyuki Saiga, Kenichi Ota, Katsuaki Hoshino, Masaki Ueno, Yoshimi Miki, Makoto Murakami, Natsuo Ueda
Organizer
第63回日本生化学会中国・四国支部例会
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[Presentation] Acid ceramidase as a third N-acylethanolamine hydrolase in cells and tissues2022
Author(s)
Tsuboi, K., Tai, T., Yamashita, R., Ali, H., Watanabe, T., Uyama, T., Okamoto, Y., Kitakaze, K., Takenouchi, Y., Rahman, I.A.S., Houchi, H., Tanaka, T., Tokumura, A., Matsuda, J., Okamoto, Y., Ueda, N.
Organizer
32nd Annual Symposium of the International Cannabinoid Research Society
Int'l Joint Research
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[Presentation] Accumulation of N-acylphosphatidylethanolamines in brain ischemia by cytosolic phospholipase A2ε2022
Author(s)
Uyama, T., Hussain, Z., Morito, K., Rahman, S.M.K., Sikder, M.M., Tanaka T., Ota, K., Ueno, M., Takahashi, H., Yamamoto, T., Murakami M., Ueda, N.
Organizer
32nd Annual Symposium of the International Cannabinoid Research Society
Int'l Joint Research
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[Presentation] High-Fat Diet-Induced Hepatic Lipid Accumulation is Decreased in PLAAT1-Deficient Mouse2022
Author(s)
Rahman S.M. Khaledur, Uyama Toru, Hussain Zahir, Sikder Mohammad Mamun, Saiga Hiroyuki, Ohta Kenichi, Hoshino Katsuaki, Ueno Masaki, Miki Yoshimi, Murakami Makoto, Ueda Natsuo
Organizer
第95回日本生化学会大会
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