エンドソーム局在型核酸認識TLRの活性制御機構の解明

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 22K07131
• Research Institution: Keio University
• Principal Investigator: 石田 英子 慶應義塾大学, 薬学部(芝共立), 助教 (70563295)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: TLR受容体 / 自然免疫 / クライオ電子顕微鏡

Outline of Annual Research Achievements

自然免疫受容体Toll-like receptor (TLR) は、微生物の構成成分を認識して免疫反応を引き起こす。TLRは病原体の侵入を防ぐとともに生体の恒常性の維持にも深く関与しており、その活性化は時空間的に厳密に制御される必要がある。UNC93B1は複数回膜貫通型の膜タンパク質であり、主に核酸認識TLRと小胞体膜上で結合し、TLRのリガンド刺激に応じてこれらTLRをエンドソームへと輸送し、機能発現に関与することが知られている。近年、UNC93B1はエンドソームにおいてSolute carrier family (SLC) 29A3およびSLC15A4（それぞれグアノシンとヒスチジンのトランスポーター）と協同して核酸認識TLRの機能制御に関与するという知見が得られつつある。本申請課題では、エンドソームにおける核酸認識TLRの活性制御機構に関して、UNC93B1、およびSLCトランスポーターとのクロストークの構造基盤を解明する。
今年度は、UNC93B1-SLC複合体の試料調製方法の検討を行った。UNC93B1とSLC29A3あるいはSLC15A4を哺乳動物細胞で共発現させ、様々な界面活性剤を用いて可溶化と精製を行った。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

UNC93B1-SLC29A3複合体およびUNC93B1-SLC15A4複合体の試料を得ることに成功したものの、クライオ電顕による構造決定には至らなかった。界面活性剤やナノディスク再構成など、電顕用の試料調製方法の検討を行う必要がある。

Strategy for Future Research Activity

UNC93B1/SLC29A3複合体、UNC93B1/SLC15A4複合体の構造解析を目指す。

Causes of Carryover

クライオ電顕に関して、共同利用費や消耗品費を計上していたが、今年度は電顕測定および解析を共同研究先に行っていただいた。そのため、これら経費は0となった。