Metabolomics analysis of plasma and exosomes for frailty biomarkers

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 22K07470
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 横山 世理奈 大阪大学, 大学院医学系研究科, 招へい教員 (50888617)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 山本 浩一 大阪大学, 大学院医学系研究科, 准教授 (00528424) ; 中神 啓徳 大阪大学, 大学院医学系研究科, 寄附講座教授 (20325369) ; 鷹見 洋一 大阪大学, 大学院医学系研究科, 助教 (90621756)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: フレイル / バイオマーカー / メタボロミクス解析

Outline of Annual Research Achievements

大阪大学医学部付属病院　老年・高血圧内科の65歳以上の男女で、入院中の患者に絞り、本人もしくは代諾者から研究参加への同意を得られた者より、申請書に記載したエントリー基準を満たす患者より血液検体を採取している。除外基準は①本人もしくは代諾者から研究参加への同意を得られなかった者、②寝たきりの者、③腎機能障害（血清クレアチニン≧2.0mg/dL）、肝障害（AST及びALT≧50U/L）を認める者、⑤悪性腫瘍を有する者、⑥余命が1ヵ月以内と推定できる者と設定している。血液検体は一般採血（血算、生化学）以外は、メタボロミクス解析、エクソソームの解析に供するためのものとして処理し、-80℃に保存している。検体の採取にあたっては、12時間以上絶食後の朝に採血し、EDTAの入った採血管を用いて、血漿を遠心分離し、内部標準物質入りの-40℃メタノールに加え、攪拌し、その後、限外濾過フィルターへ移し、遠心し、真空蒸着を行った。検体は-80℃保存している。血漿からのエクソソームの抽出に際しては、qEV35（メイワフォーシス）を用いたsize exclusion chromatographyにより行った。また、エクソソームの一部はフレイルの関連する臓器特異的表面マーカー（神経であればL1CAM、筋肉であればα-sarcoglycan）による分離に供するために懸濁液にて-80℃で保存している。
研究対象患者のフレイル指標や臨床指標は厳重なセキュリティー・ポリシーの下、管理している。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

現状での研究対象患者のエントリーはフレイル、非フレイル、それぞれ数人であり、メタボロミクス解析には至っていないため。

Strategy for Future Research Activity

更に、研究対象患者のエントリーを進め、一定数のフレイル及び非フレイル患者の検体が揃えば、フレイル関連のメタボロミクス解析を行いたいと考えている。また、その後の予後や運動介入に関連する血漿及びエクソソーム中のフレイル関連バイオマーカーを見出したいと考えている。