2022 Fiscal Year Research-status Report
遺伝性感覚自律神経性ニューロパチーの原因及び細胞学発症機序の解明
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22K07495
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| Research Institution | Kagoshima University |
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Principal Investigator |
袁 軍輝 鹿児島大学, 医歯学総合研究科, 特任研究員 (90790254)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | 遺伝性感覚自律神経性ニューロパチー / NGS/WES / RFC1 / DNTM1 / 細胞モデル |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1）遺伝性感覚自律神経性ニューロパチー（HSAN）の遺伝子診断について、近年RFC1およびNOTCH2NLC内のリピート拡張を解析した報告があり、注目されている。2021年12月までに、日本人HSAN患者の79例の遺伝子解析を実施し、RFC1遺伝子のリピート拡張異常を20例検出することができた。一方、NOTCH2NLCのGGCリピート拡張は1例同定することができた。日本におけるHSANの遺伝的スペクトルと臨床特徴をまとめて、学術論文として発表した(Yuan et al, Frontiers in Neurology, 2022)。
2）HSAN type 1Eの原因であるDNMT1の遺伝子変異細胞モデルを作成し、その機能解析を行った。pcDNA3.1プラスミドを使用して変異を導入し、HEK293TとSH-SY5Y細胞にトランスフェクトした。HEK293T細胞からタンパク質の発現を確認し、精製を行い、Western blotやDNMT1タンパク質活性アッセイを行った。変異体のタンパク質の発現量と活性に異常が見出した。また、細胞免疫蛍光染色により、DNMT1変異体の異常な分布も証明された。現在、この研究に関する論文を執筆中である。
3）SCN9A遺伝子変異関連神経痛疾患について、臨床的に肢端紅痛症と診断された患者6人のうち、2例がSCN9A変異を有することを明らかにした。さらに、他の2例はParoxysmal extreme pain disorder (PEPD)の患者であり、合わせて4人の患者を集めた。このうち一つの変異は新規であったため、イェール大学Stephen Waxman教授との共同研究でSodium Channelの機能解析を実施した。現在、4例の患者について論文を作成中であり、次年度に学術論文として報告予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
1）リピート拡張異常を含む遺伝子検査を継続して実施できており、順調に進んでいる。
2)HSAN患者の国内疫学データや臨床的特徴を明らかにし、論文に掲載することができた。
3)遺伝性末梢神経疾患の変異体細胞モデル解析プラットフォームを構築し、DNMT1遺伝子変異の機能解析も順調に進展している。
4)神経障害性疼痛について、遺伝子解析が完了し、イエール大学との共同研究にて機能解析も順調に進んでいる。次年度に学術論文として投稿予定である。
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| Strategy for Future Research Activity |
1)SCN9AとDNMT1の論文の完成に向けて作業を進めており、次年度に投稿予定である。
2)遺伝子変異細胞モデルプラットフォームを利用して、次年度は他の遺伝子の機能解析を進める予定である。
3)WES解析を進め、新規変異の病的意義を明らかにする予定である。
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