恐怖記憶の処理過程に対するリルゾールの作用メカニズムの検討

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 22K07630
• Research Institution: National Center of Neurology and Psychiatry
• Principal Investigator: 山田 美佐 国立研究開発法人国立精神・神経医療研究センター, 精神保健研究所 精神薬理研究部, 客員研究員 (10384182)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 山田 光彦 国立研究開発法人国立精神・神経医療研究センター, 精神保健研究所 精神薬理研究部, 部長 (60240040) ; 三輪 秀樹 国立研究開発法人国立精神・神経医療研究センター, 精神保健研究所 精神薬理研究部, 室長 (80468488) ; 古家 宏樹 国立研究開発法人国立精神・神経医療研究センター, 精神保健研究所 精神薬理研究部, 室長 (90639105)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: リルゾール

Outline of Annual Research Achievements

申請者はこれまでに、リルゾールが恐怖記憶の再固定化阻害及び消去学習促進作用を有することを報告した。リルゾールは多様な薬理作用を有するが、恐怖記憶の処理過程に対するメカニズムは明らかではない。そこで本研究では、リルゾールの恐怖記憶の再固定化阻害及び消去学習促進作用のメカニズムを明らかとすることを目的とした。初年度である本年度は、リルゾールが神経のみならずグリア細胞にも作用すること(Dall'Igna, 2013)、炎症性サイトカインであるTNFαにより恐怖記憶や消去学習が影響を受けること (Yu, 2017)などから、ミクログリアを用いて炎症性サイトカイン産生に対するリルゾールの作用に焦点をあてて検討した。
リポポリサッカライド(LPS)によるミクログリアからのTNFα放出の亢進は、リルゾールの濃度依存的に抑制された。また、他の炎症性サイトカインであるIL-6、IL-1βについても検討した結果、LPSによるこれらの炎症性サイトカインの放出の亢進をリルゾールは抑制した。リアルタイムPCRを行った結果、LPSで誘導されたTNFα、IL-6、IL-1βの亢進に対するリルゾールの抑制作用はmRNAレベルでも認められた。さらにウエスタンブロットにより、LPSによるNF-κBの核への移行がリルゾールにより抑制されること、LPSによるリン酸化IκBの増加がリルゾールにより抑制されることが明らかとなった。これらのことから、リルゾールはNF-κB 経路に作用して、LPS誘発炎症性サイトカイン放出を抑制すると考えられた。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

本年度は、ミクログリアを用いて炎症性サイトカインの放出に対するリルゾールの作用に焦点をあてて検討した。当初計画していたTNFαに加えて、IL-6、IL-1βも検討した。さらに、リルゾールの作用部位についても明らかにできた。これらのことから、「おおむね順調に進展している」と考える。

Strategy for Future Research Activity

本年度に引き続き、LPSによる炎症性サイトカイン放出に対するリルゾールの抑制メカニズムをさらに詳細に検討する。具体的には、ウエスタンブロット法により、MAPK系の関与を明らかにすることを計画している。

Causes of Carryover

コロナ感染拡大の影響による在宅勤務の増加により、計画した実験消耗品購入が少なかったこと、研究会及び学会等への参加を控えたことなどにより次年度使用額が生じた。試薬等の価格が高騰していることから、翌年度分と合わせて有効に使用できると考える。