2023 Fiscal Year Research-status Report
Blood flow mediates adipose tissue inflammation via endothelial cells.
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22K08125
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
匹田 貴夫 岡山大学, 研究推進機構, 特任准教授 (00437005)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2025-03-31
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| Keywords | 血管内皮細胞 / 炎症 / メタボリックシンドローム / 細胞極性 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
1. メタボリックシンドロームモデルマウスにおけるPAR-3欠損の影響(1-2年目)
野生型マウスに対し通常食、高脂肪食、または高脂肪食の後に通常食を一定期間与える脱肥満モデルを作成し、内臓脂肪、大動脈、腎臓および肝臓を採取し、免疫細胞により血管内皮細胞のaxial polarityと内蔵脂肪、PVATおよび組織におけるマクロファージ浸潤の関連を解析した。これらの知見をもとに、血管内皮細胞特異的・誘導的にPard3遺伝子をノックアウトしたマウスを用いて食餌誘導性のメタボリックシンドロームモデルマウスを作成し、血管内皮細胞の極性、遊走マクロファージ、レジテンドマクロファージの内蔵脂肪、PVATおよび肝臓、腎臓における役割の解析を進めている。
2. 炎症性アディポカインの血管内皮細胞の液流に対する感受性への影響(2-3年目)
R6年度においては、初代培養血管内皮細胞に対してコントロールsiRNAまたはPard3 siRNAをトランスフェクションにより導入し、得られた培養上清を回収、脂肪細胞に処理する事により炎症反応、特にメタボリックシンドロームの進展に関わる因子が変動する知見を得た。また、上記因子を脂肪細胞において上昇させる上流因子を阻害剤処理により探索している。候補阻害剤の濃度を振りIC50が得られるかどうかで絞り込みを行い、同定された阻害剤の標的分子に対しsiRNAにより発現抑制を行う事で特異性を確認する。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
in vitro, in vivo実験共に順調に進行している。特に脂肪細胞の炎症を制御しうる分子の候補が複数同定され、また、野生型マウスを用いた予備試験により興味深い知見が得られたため、血管内皮細胞特異的ノックアウトマウスを用いた実験の結果に期待される。
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| Strategy for Future Research Activity |
食餌誘導性メタボリックシンドロームモデルマウスは内蔵脂肪の蓄積に加え、脂肪肝様の表現型を呈する。血管内皮細胞特異的・誘導的Pard3ノックアウトマウスは全身の血管のうち流れが遅い領域で炎症を起こしやすい。当初仮説に基づき脂肪組織/PVATの解析を進める一方、肝臓など脂肪が蓄積しやすく、かつ、血流の遅い領域にも着目し研究を推進する。
血管内皮細胞は脂肪細胞含め様々な組織と相互作用しており、血管内皮細胞の機能障害は組織を構成する上皮細胞の機能障害につながる。本研究の仮説は、血管内皮細胞の炎症がマクロファージの脂肪組織への遊走を促進する事でメタボリックシンドロームの原因となる事である。この点を明らかにするため、放射線照射による骨髄破壊など血中マクロファージを除いたPard3KOマウスに高脂肪食を与える事で、肥満における組織障害の原因がマクロファージである事を検証したい。
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| Causes of Carryover |
R6年度において予定していた実験・研究は実施された。一方で、必要であった試薬類、特に阻害剤処理および遺伝子解析を共同研究により実施したため消耗品および共同実験機器利用費を大幅に抑えることが可能であった。
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