内皮型NO合成酵素制御および血管内皮機能調整における時計遺伝子DEC1の役割

2023 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 22K08207
• Research Institution: Hiroshima University
• Principal Investigator: 丸橋 達也 広島大学, 原爆放射線医科学研究所, 准教授 (10727069)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 東 幸仁 広島大学, 原爆放射線医科学研究所, 教授 (40346490) ; 中島 歩 山梨大学, 大学院総合研究部, 教授 (40448262)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: 血管内皮機能 / 時計遺伝子

Outline of Annual Research Achievements

抑制的時計遺伝子differentiated embryo chondrocyte 1 (Dec1)は、liver kinase B1 (LKB1) のリン酸化を抑制することでadenosine monophosphate-activated protein kinase (AMPK) のリン酸化を抑制することが示唆されている。本研究では、血管内細胞にて、DEC1発現が、LKB1/AMPKを介して、内皮型一酸化窒素合成酵素 （eNOS: endothelial nitric oxide synthase） のリン酸化および、血管内皮機能に及ぼす影響について検討を行っている。6週齢の野生型マウスとDEC1ノックアウトマウスから血管内皮細胞の単離・培養を行い、①大気下野生型マウス内皮細胞、②低酸素下野生型マウス内皮細胞、③大気下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞、④低酸素下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞において、LKB1、AMPK、eNOSそれぞれのリン酸化/発現について比較検討を行った。②低酸素下野生型マウス内皮細胞にてDEC1の発現が増加することが確認された。③大気下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞にてeNOSリン酸化が亢進することが確認された。また、③大気下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞にてLKB1リン酸化およびAMPKリン酸化が亢進することが確認された。現在、AMPKリン酸化阻害薬であるcompound Cにて、③大気下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞のeNOSリン酸化が抑制されるかどうか確認中である。動物実験により、DEC-1ノックアウトマウスの血圧は、野生型マウスより低く、NOS阻害薬により、両群の血圧は上昇し、群間差が消失することを確認した。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

大動脈リング実験に着手できていない。

Strategy for Future Research Activity

AMPKリン酸化阻害薬であるcompound Cにて、大気下DEC1ノックアウトマウス内皮細胞のeNOSリン酸化が抑制されるかどうか確認を行いたい。