The role of the lung microbiota-derived proapoptotic peptide (corisin) in COPD

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 22K08280
• Research Institution: Mie University
• Principal Investigator: GABAZZA CORINA 三重大学, 医学系研究科, 特任講師(研究担当) (10750656)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): Gabazza Esteban 三重大学, 医学系研究科, 教授 (00293770) ; 戸田 雅昭 三重大学, 医学系研究科, 講師 (10202201) ; 小林 哲 三重大学, 医学系研究科, 教授 (20437114) ; 安間 太郎 三重大学, 医学部附属病院, 助教 (80773887)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: COPD / 肺内細菌叢 / アポトーシス / ELISA法 / コリシン

Outline of Annual Research Achievements

令和４年度はCOPDモデルを作成して、コリシンの濃度を測定した。MMP-2過剰発現トランジェニックマウス及び野生型マウスに毎日30分、一日一回、3週間、タバコ煙抽出物を吸入させ、COPDモデルを作製した。 Micro-computed tomographyでlow-attenuation areaを確認し、トランジェニックマウスとコントロールの野生型マウスに麻酔のイソフランを投与し、頚静脈から全採血し、肺から気管支肺胞洗浄液を回収し、致死させた後、肺組織を採取した。次にCorisinの濃度を測定のために、抗トランスグリコシラーゼ351ポリクローナル抗体を捕捉抗体（固相用抗体）、ビオチン化抗コリシンモノクローナル抗体を検出抗体とする酵素結合免疫アッセイを開発した。実験で採取した検体でのコリシンの濃度を測定したところ、タバコ煙抽出物を吸入させた群ではタバコ煙抽出物を吸入させていない群に比べて、コリシンの濃度が高かったことが分かった。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

実験用の材料がすべて揃ったので研究はおおむね順調に進展している。

Strategy for Future Research Activity

本年はコリシンによる肺胞上皮細胞、動脈血管内皮細胞、肺胞マクロファージの活性化・アポトーシスの検討：野生型（C57BL/6）マウスモデル由来肺動脈内皮細胞・肺胞上皮細胞はコラゲナーゼ法で、肺胞マクロファージは気管支肺胞洗浄液から分離する。人由来の肺動脈内皮細胞(HAPEC)・肺胞上皮細胞（A549）・単球（THP-1）の細胞株も実検に用いる。各々の細胞はcorisin又はscrambled peptideの存在下で培養し、48時間後に細胞死の程度をflow cytometry、免疫染色、Western blotting法で確認する。

Research Products

• [Journal Article] Transforming Growth Factorβ1 Overexpression Is Associated with Insulin Resistance and Rapidly Progressive Kidney Fibrosis under Diabetic Conditions (2023)
  • Author(s): D'Alessandro Fridman V, Takeshita A, Yasuma T, Toda M, D'Alessandro-Gabazza CN, Okano Y, Tharavecharak S, Inoue C, Nishihama K, Fujimoto H, Kobayashi T, Yano Y, Gabazza EC
  • Journal Title: International Journal of Molecular Sciences Volume: 23 Pages: 「－」
  • DOI: 10.3390/ijms232214265.
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Inhibition of a Microbiota-Derived Peptide Ameliorates Established Acute Lung Injury (2023)
  • Author(s): D'Alessandro Fridman V, D'Alessandro-Gabazza CN, Yasuma T, Toda M, Takeshita A, Tomaru A, Tharavecharak S, Lasisi IO, Hess RY, Nishihama K, Fujimoto H, Kobayashi T, Cann I, Gabazza EC.
  • Journal Title: American Journal of Pathology Volume: 23 Pages: 「－」
  • DOI: 10.1016/j.ajpath.2023.03.003.
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Is Helicobacter pylori infection inversely correlated with atopic, skin, and autoimmune diseases? (2022)
  • Author(s): Yasuma T, D'Alessandro-Gabazza CN, Fujimoto H, Kobayashi T, Imoto I, Gabazza EC.
  • Journal Title: Allergy Volume: 77 Pages: 3165-3166
  • DOI: 10.1111/all.15306.
  • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
• [Presentation] ブレオマイシン肺線維症マウスモデルにおける肺内細菌叢由来の細胞死因子（コリシン）の経時的変動の検討 (2022)
  • Author(s): 都丸 敦史、齋木 晴子、鶴賀 龍樹、藤原 拓海、岡野 智仁、浅山 健太郎、高橋 佳紀、中原 博紀、藤本 源、Corina N. D’Alessandro-Gabazza、Esteban C. Gabazza、小林 哲
  • Organizer: 第62回日本呼吸器学会学術講演会
• [Presentation] The Role of the Lung Microbiota in Acute Exacerbation of Pulmonary Fibrosis (2022)
  • Author(s): Valeria Fridman D’Alessandro, Tomohito Okano, Haruko Saiki, Tatsuki Tsuruga, Kentaro Asayama, Atsushi Tomaru, Hiroki Nakahara, Hajime Fujimoto, Corina N. D’Alessandro-Gabazza, Esteban C. Gabazza, Tetsu Kobayashi
  • Organizer: 第62回日本呼吸器学会学術講演会
• [Presentation] 微生物叢由来ペプチドの異なる細胞株に対するアポトーシス誘導の検討 (2022)
  • Author(s): 齋木 晴子、小林 哲、鶴賀 龍樹、藤原 拓海、浅山 健太郎、岡野 智仁、都丸 敦史、高橋 佳紀、中原 博紀、藤本 源、Corina N. D’Alessandro-Gabazza、Esteban C. Gabazza
  • Organizer: 第62回日本呼吸器学会学術講演会
• [Presentation] 肺線維症モデルマウスにおける肺内細菌叢の検討 (2022)
  • Author(s): 藤本 源、小林 哲、ガバザ エステバン
  • Organizer: 第71回日本アレルギー学会学術大会