造血幹細胞移植後のトキソプラズマ症診断におけるPCR法の有用性の検討と臨床応用

2022 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 22K08472
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 森 毅彦 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 教授 (70296581)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 三木田 馨 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 講師 (40793881)
• Project Period (FY): 2022-04-01 – 2025-03-31
• Keywords: トキソプラズマ症 / 造血幹細胞移植 / PCR / 等温遺伝子増幅法

Outline of Annual Research Achievements

予後が極めて不良なトキソプラズマ症の診断および抗体陽性者において再活性化の早期検出にPCRが有用であるかが不明あるため、自施設および他施設の造血幹細胞移植患者を対象にトキソプラズマ症の診断およびT. gondiiの再活性化の早期検出におけるPCRの有用性を明らかにすることを目的としている。
令和4年度は実施計画にある①確定診断例の臨床検体は該当症例がなく、②トキソプラズマ症が疑われる症例の臨床検体からのPCRによるT. gondiiの検出および③トキソプラズマ抗体陽性者のPCRによるT. gondii再活性化のモニタリングのための検討が実施された。自施設および他施設からの症例を対象とした。陰性例が多かったが、一部には陽性となる検体があり、その結果に基づきトキソプラズマ症に対する治療が開始され、有効であった症例もあった。その症例は救命に至り、症例報告を投稿した。
本研究ではnested PCRを用いた系による検討を行っているが、その検査法は特異度は高いものの、感度が十分でないことが明らかになった。その限界を解消するために、同じ遺伝子増幅法であるが、等温遺伝子増幅法であるLAMP(loop-mediated isothermal amplification)法の開発を進めている。陽性コントロールを用いて検討では、nested PCRと同程度の感度であったが、臨床検体では69.2%とnested PCRの46.1%よりも高い感度が示された。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

順調に自施設および他施設からの臨床検体を受け入れ、研究を継続している。トキソプラズマ症は稀少疾患であるため、十分な症例数を蓄積するためには残り2年の研究期間を用いて研究を継続する。
また従来までのnested PCRに加えて、より感度が高く、迅速性のある等温遺伝子増幅法であるLAMP(loop-mediated isothermal amplification)法の検討も順調に進んでおり、さらに高い感度の検査系の樹立が進んでいる。

Strategy for Future Research Activity

R5年度以降も自施設および他施設からの臨床検体を受け入れ、臨床検体からのトキソプラズマDNAを遺伝子増幅して臨床にfeedbackする研究を継続する。
Nested PCRより高感度で簡便であり、独自に開発中の等温遺伝子増幅法であるLAMP(loop-mediated isothermal amplification)法の検討をさらに進める。