2023 Fiscal Year Research-status Report
炎症性筋疾患の筋膜におけるCXCL13発現細胞の局在と細胞種の同定
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22K08530
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| Research Institution | Jikei University School of Medicine |
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Principal Investigator |
吉田 健 東京慈恵会医科大学, 医学部, 准教授 (20398796)
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| Project Period (FY) |
2022-04-01 – 2026-03-31
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| Keywords | CXCL10 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
16症例［皮膚筋炎10例（抗合成酵素症候群を含む）と多発性筋炎6例（抗合成酵素症候群を含まず）］の筋膜を含んだ筋生検組織を用いてトランスクリプトーム解析行ったが、不適切症例を除き再度、15症例［皮膚筋炎9例（抗合成酵素症候群を含む）と多発性筋炎6例（抗合成酵素症候群を含まず）］でトランスクリプトーム解析を行った。その結果、多発性筋炎の筋膜と比較して皮膚筋炎の筋膜ではCXCL13の発現量は10倍以上と高発現していたが、補正したp-value (FDR p-value)では0.05未満に至らなかった。しかし、同じCXCLケモカインの中でCXCL10が15倍以上と高発現しており、FDR p-valueも0.05未満であったため、まずはCXCL10を解析対象とした。筋膜でCXCL10を高発現している局在と細胞種を同定するためにin situ hybridization (ISH)を行った。その結果、CXCL10は炎症細胞が浸潤している周囲に多く存在する傾向がみられた。また、炎症細胞が浸潤していない部位でも観察される部位がみられた。CXCL10陽性細胞の中で細胞の形態上、紡錘形であるものが存在したため、線維芽細胞をはじめとする間葉系細胞マーカーの1つであるビメンチンとCXCL10の二重染色を行った。その結果、多発性筋炎の筋膜と比較して皮膚筋炎の筋膜ではダブルポジティブの細胞数が有意に多かった。現在、線維芽細胞以外のCXCL10発現細胞としてマクロファージの存在を確認するためCD68陽性細胞も含め、CXCL10、ビメンチン、CD68の3重染色の条件設定を行っている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
in situ hybridizationにおいて3重染色に使用している蛍光色素の波長により最適な蛍光顕微鏡のフィルターにを交換し、再度条件設定をしているため。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後はCXCL10発現細胞が線維芽細胞とマクロファージのどちらが多く産生しているかin situ hybridizationを用い検討する。
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| Causes of Carryover |
予定より試薬量を節約できたため次年度使用額が生じた。in situ hybridizationの試薬代が高価なためこの差額分も試薬代に充てる予定である。
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Research Products
(1 results)
