2022 Fiscal Year Research-status Report

家族性地中海熱の病態における免疫老化の意義を明らかにする研究

Research Project

Project/Area Number	22K08544
Research Institution	Nagasaki University
Principal Investigator	古賀智裕長崎大学, 病院(医学系), 講師 (90537284)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	浦野健島根大学, 学術研究院医学・看護学系, 教授 (70293701) 田中義正長崎大学, 先端創薬イノベーションセンター, 教授 (90280700) 川上純長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 教授 (90325639)
Project Period (FY)	2022-04-01 – 2025-03-31
Keywords	家族性地中海熱
Outline of Annual Research Achievements	家族性地中海熱(FMF)は関節炎や漿膜炎を伴う周期性発熱を特徴とし、pyrin蛋白をコードする地中海熱(MEFV)遺伝子のバリアントが病態に深く関与する自己炎症疾患である。これまでの知見は遺伝的要因に加えて加齢による免疫老化が、特に日本人FMFの病態に寄与している可能性を示しているが、免疫老化が自己炎症性疾患に与える影響やそのメカニズムは未解明のままである。本研究では、研究代表者が独自に作成したヒトMEFV遺伝子ノックインマウスと臨床情報が統合されたFMFレジストリの両者を活用し、免疫老化がFMFの病態に与える影響を明らかにする。 FMFモデルマウスを用いたFMFの発症や病態進展に寄与する免疫老化に関連する分子群の同定(古賀・研究協力者:吉浦)において、低週齢マウスと老齢マウスの腹腔内マクロファージを用いたインフラマソーム刺激後のシングルセルRNA-seq解析を行い、マウス老化細胞におけるDNA損傷がインフラマソームの活性化に与える影響を検討した。その結果、高齢MEFV遺伝子M694IノックインマウスにてcytotoxicやIFNなどのシグネチャが相対的に高い点が示された。FMF患者のMEFV遺伝子バリアント、重症度および病型と免疫老化との関連(古賀・川上・研究協力者:右田・吉浦)に関してはFMF患者症例レジストリの拡充を行った。また、発症年齢別のFMF患者における血清中の活性型IL-1β、活性型IL-18の測定(古賀・田中・浦野)に関しては上記抗体を用いた独自のELISA法を確立した。
Current Status of Research Progress	Current Status of Research Progress 2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned. Reason モデルマウスを用いたRNA-seq解析での結果が得られたため、FMF患者のMEFV遺伝子バリアント、重症度および病型と免疫老化との関連に関する研究および、発症年齢別のFMF患者における血清中の活性型IL-1β、活性型IL-18の測定に関する研究についても発展が見込まれる。
Strategy for Future Research Activity	今後は、FMFモデルマウスを用いたFMFの発症や病態進展に寄与する免疫老化に関連する分子群の同定においては今回の解析をさらに他のバリアント（E148Q）にも拡大し、in vitroの実験による機能解析も予定する。FMF患者のMEFV遺伝子バリアント、重症度および病型と免疫老化との関連については、FMFの臨床情報を前向きおよび後ろ向きに詳細に収集したレジストリを活用し、前述のFMFモデルマウスで得られた知見を参考に病型分類、治療反応性、アミロイドーシス合併例と免疫老化との関連、を明らかにする。発症年齢別のFMF患者における血清中の活性型IL-1β、活性型IL-18の測定に関しては上記抗体を用いた独自のELISA法が確立したため、FMF血清バンクの残余検体と新規登録患者におけるカスパーゼで切断された断端を認識する活性型のIL-1βと活性型IL-18を検出し、発症年齢別に準定量評価することでFMFにおけるインフラメージングの関与を明らかにする。